检测项目
1.VZV-DNA实时荧光定量PCR:靶基因为ORF62基因片段,灵敏度≥50copies/mL
2.病毒分离培养:采用人胚肺成纤维细胞(HELF)培养体系,观察细胞病变效应(CPE)
3.IgM/IgG抗体ELISA检测:包被抗原为VZV糖蛋白E(gE),临界值OD450≥0.6
4.直接免疫荧光法(DFA):标记抗VZV单克隆抗体FITC荧光素
5.组织病理学检查:苏木精-伊红染色观察多核巨细胞及核内包涵体
检测范围
1.水疱液样本:用于病毒分离培养及PCR核酸检测
2.血清/血浆样本:适用于IgM/IgG抗体定量分析
3.皮肤组织切片:用于免疫组化及病理学诊断
4.脑脊液样本:针对中枢神经系统感染病例
5.呼吸道分泌物:用于播散性感染的病原学确认
检测方法
1.PCR扩增:依据ISO15189《医学实验室质量和能力要求》建立标准化流程
2.病毒培养:参照WS/T420-2013《疱疹病毒分离鉴定技术规范》
3.ELISA法:执行GB/T37870-2019《抗病毒抗体检测通则》标准
4.免疫荧光法:符合ASTME2148-16《临床免疫荧光试剂盒评价规程》
5.病理诊断:采用GB/T38502-2020《诊断病理学技术规范》制片标准
检测设备
1.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法多重检测
2.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:具备450nm/630nm双波长读取功能
3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机:最大转速30,000rpm
4.LeicaDM2000LED荧光显微镜:配置FITC/TRITC双通道滤光片组
5.NuAireNU-583生物安全柜:符合NSF/ANSI49ClassII标准
6.MemmertCO2培养箱:温度控制精度0.1℃,CO2浓度波动≤0.2%
7.RocheCobase601化学发光仪:支持电化学发光免疫分析技术
8.SakuraTissue-Tek全自动脱水机:程序化处理12小时完成石蜡包埋
9.Agilent2100生物分析仪:用于DNA/RNA完整性评估(RIN≥7)
10.OlympusBX53显微成像系统:配备20-100油浸物镜及CCD相机模组