检测项目
1.形态学鉴定:体长测量(0.8-1.2mm)、栉齿数量(颊栉≥4列)、受精囊形态(梨形结构)
2.基因测序:COI基因序列分析(658bp)、ITS2区域扩增(300-400bp)、18SrRNA比对
3.病原体筛查:鼠疫耶尔森菌(Yersiniapestis)PCR检测、巴尔通体(Bartonellaspp.)抗体ELISA测试
4.抗药性检测:拟除虫菊酯类(氯菊酯LC50值测定)、有机磷类(毒死蜱抗性基因kdr突变分析)
5.种群密度评估:每宿主寄生量统计(≤50只/鼠)、性别比测定(雌雄比例1:0.8-1.2)
检测范围
1.啮齿动物活体检体(褐家鼠、黑线姬鼠等)表皮样本
2.动物巢穴残留物(毛发、皮屑混合物)
3.仓储货物夹层分离物(粮食、纺织品纤维)
4.历史标本馆藏标本(乙醇固定超过20年的标本)
5.环境介质样本(土壤湿度>30%的洞穴沉积物)
检测方法
ASTME2275-19《节肢动物形态鉴定标准指南》栉齿计数法
ISO/IEC17025:2017《检测实验室能力验证规范》质控流程
GB/T34748-2017《蚤类标本制作与保存技术规范》乙醇梯度脱水法
GB14922.2-2011《实验动物微生物学等级及监测》寄生虫筛查规程
WHO/CDS/CSR/APH/2000.5《鼠传疾病监测技术手册》种群密度评估法
检测设备
OlympusSZX16体视显微镜(16.5:1变焦比,LED冷光源系统)
HitachiSU3500扫描电镜(15kV加速电压,二次电子探测器)
ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(六通道光学系统)
IlluminaMiSeq基因测序仪(2300bp双端读长模式)
LeicaCM1950冷冻切片机(-50℃至0℃温控精度1℃)
SartoriusCP225D电子天平(0.01mg分辨率,四级防震系统)
MemmertIN260培养箱(温度波动度0.3℃,CO₂浓度控制模块)
BeckmanCoulterDTX880多功能酶标仪(波长范围220-1000nm)
MilestoneETHOSEASY微波消解仪(40位高压反应罐,温度监控精度2℃)
ESCOAC2-4S1生物安全柜(ISOClass3级过滤效率99.999%)