检测项目

1.病原菌形态学鉴定：菌落直径（24h/72h生长量）、分生孢子尺寸（8-126-9μm）、菌丝隔膜特征

2.分子生物学检测：ITS序列比对（GenBank相似度≥99%）、β-tubulin基因扩增（PCR产物长度420bp）

3.孢子悬浮液浓度测定：血球计数板法（110^3~110^6spores/mL梯度）

4.侵染程度评估：病斑面积占比（ImageJ软件分析＞15%为阳性）、菌丝穿透深度（显微测量＞200μm）

5.真菌毒素检测：灰霉毒素I/II型（HPLC-MS/MS法检出限0.001mg/kg）

检测范围

1.鲜食甘薯块茎（表皮损伤部位优先取样）

2.加工用甘薯切片（含水率＞70%的原料）

3.贮藏期发病茎叶组织（黄化/萎蔫症状样本）

4.育苗期种薯（芽眼周围5mm剖面样本）

5.土壤残留病原体（耕作层0-20cm混合样）

检测方法

ISO16000-18:2011室内空气-第18部分：真菌孢子采样与培养鉴定

GB/T28066-2011农作物病害田间监测技术规范

ASTMD8219-20农产品真菌毒素快速检测标准指南

SN/T2668-2010进出口食品中灰葡萄孢检疫规程

NY/T1464-2007蔬菜病害诊断与防治技术规程

检测设备

OlympusBX53荧光显微镜：配备DP27相机（1600万像素），用于菌丝结构观察与图像采集

ThermoScientificHeratherm微生物培养箱：温度控制0.1℃，湿度范围30-95%RH

Agilent1290InfinityIIHPLC系统：配备6465三重四极杆质谱仪（毒素定量分析）

Bio-RadCFX96Touch实时荧光定量PCR仪：支持SYBRGreen法病原基因拷贝数测定

SartoriusSecura225D电子天平：称量精度0.01mg（培养基配制专用）

MemmertIPP110培养箱：CO2浓度控制0.2%（病原菌诱导产孢）

LeicaCM1950冷冻切片机：组织样本-25℃低温切片（厚度5μm）

MilliporeMilli-Q纯水系统：电阻率18.2MΩcm（分子生物学实验用水）

ESCOAC2-4S1生物安全柜：HEPA过滤效率99.99%（病原分离操作平台）