检测项目

1.病原菌形态学鉴定:菌落直径(24h/72h生长量)、分生孢子尺寸(8-126-9μm)、菌丝隔膜特征

2.分子生物学检测:ITS序列比对(GenBank相似度≥99%)、β-tubulin基因扩增(PCR产物长度420bp)

3.孢子悬浮液浓度测定:血球计数板法(110^3~110^6spores/mL梯度)

4.侵染程度评估:病斑面积占比(ImageJ软件分析>15%为阳性)、菌丝穿透深度(显微测量>200μm)

5.真菌毒素检测:灰霉毒素I/II型(HPLC-MS/MS法检出限0.001mg/kg)

检测范围

1.鲜食甘薯块茎(表皮损伤部位优先取样)

2.加工用甘薯切片(含水率>70%的原料)

3.贮藏期发病茎叶组织(黄化/萎蔫症状样本)

4.育苗期种薯(芽眼周围5mm剖面样本)

5.土壤残留病原体(耕作层0-20cm混合样)

检测方法

ISO16000-18:2011室内空气-第18部分:真菌孢子采样与培养鉴定

GB/T28066-2011农作物病害田间监测技术规范

ASTMD8219-20农产品真菌毒素快速检测标准指南

SN/T2668-2010进出口食品中灰葡萄孢检疫规程

NY/T1464-2007蔬菜病害诊断与防治技术规程

检测设备

OlympusBX53荧光显微镜:配备DP27相机(1600万像素),用于菌丝结构观察与图像采集

ThermoScientificHeratherm微生物培养箱:温度控制0.1℃,湿度范围30-95%RH

Agilent1290InfinityIIHPLC系统:配备6465三重四极杆质谱仪(毒素定量分析)

Bio-RadCFX96Touch实时荧光定量PCR仪:支持SYBRGreen法病原基因拷贝数测定

SartoriusSecura225D电子天平:称量精度0.01mg(培养基配制专用)

MemmertIPP110培养箱:CO2浓度控制0.2%(病原菌诱导产孢)

LeicaCM1950冷冻切片机:组织样本-25℃低温切片(厚度5μm)

MilliporeMilli-Q纯水系统:电阻率18.2MΩcm(分子生物学实验用水)

ESCOAC2-4S1生物安全柜:HEPA过滤效率99.99%(病原分离操作平台)