检测项目

1.病原菌分离培养：采用PDA培养基（pH5.6-6.2），251℃暗培养7-14天

2.菌丝形态学鉴定：测量菌丝直径（3.5-8.2μm）、隔膜间距（50-200μm）及分生孢子特征

3.分子生物学检测：ITS序列扩增（引物ITS1/ITS4），PCR产物长度500-600bp

4.土壤菌丝密度测定：定量PCR法测定单位土壤DNA含量（≥0.5ng/μL）

5.根系侵染率统计：显微观察法计算侵染面积占比（精度0.1%）

检测范围

1.荚蒾属植株样本（Viburnumspp.）包括根茎叶组织切片

2.苗圃栽培基质（泥炭土:珍珠岩=3:1混合基质）

3.灌溉水样（采集量≥500mL/批次）

4.发病区周边植物根系样本（半径50m内）

5.土壤剖面样本（分层采集0-30cm深度）

检测方法

1.ISO21458:2018《植物病原真菌分子鉴定技术规范》

2.GB/T36743-2018《土壤微生物生物量测定方法》

3.ASTMD7907-14《植物病原菌分离培养标准指南》

4.GB/T3543.4-1995《农作物种子检验规程》病害检验

5.ISO17601:2016《土壤DNA提取与定量方法》

检测设备

1.PCR扩增仪（ABIVeritiPro）：温度精度0.1℃，支持梯度PCR

2.荧光显微镜（OlympusBX53）：配备DP80双摄像头系统（分辨率40803072）

3.超净工作台（ESCOACB-4A1）：洁净度ISO5级（≤3,520颗粒/m）

4.冷冻离心机（Eppendorf5430R）：最大转速30,000rpm（RCF100,000g）

5.凝胶成像系统（Bio-RadChemiDocMP）：灵敏度0.1ngDNA/band

6.恒温培养箱（MemmertIPP110）：温度波动0.3℃，湿度控制范围30-95%RH

7.土壤研磨仪（RetschRM200）：粉碎粒径≤0.1mm（符合ISO11464标准）

8.实时荧光定量PCR仪（RocheLightCycler480II）：动态范围10^1-10^9拷贝数/反应

9.DNA浓度测定仪（ThermoNanoDropOneC）：测量范围2-27,500ng/μL（精度1%）

10.高压灭菌锅（Tuttnauer3870EL）：灭菌温度121℃1℃，压力0.22MPa可调