检测项目
1.隐窝结构形态分析:测量隐窝深度(50-500μm)、隐窝分支角度(0-180)、隐窝密度(5-15个/mm)
2.炎症细胞定量检测:中性粒细胞计数(0-50个/HPF)、淋巴细胞密度(100-500个/mm)、浆细胞浸润分级(Ⅰ-Ⅳ级)
3.微生物定植评估:菌群丰度指数(Shannon3.5-7.0)、致病菌检出限(10CFU/g)、生物膜厚度(5-200μm)
4.黏膜屏障功能测试:跨膜电阻值(TEER15-50Ωcm)、紧密连接蛋白表达量(ZO-1≥1.2ng/mg)
5.细胞因子水平测定:IL-8(≤15pg/mg)、TNF-α(≤8pg/mg)、IFN-γ(≤5pg/mg)检测灵敏度0.1pg/mL
检测范围
1.肠道活检组织样本(新鲜/石蜡包埋)
2.内镜采集的隐窝冲洗液
3.体外培养的类器官模型
4.实验动物肠道组织切片
5.微生物共培养体系样本
检测方法
1.ASTMF2315-18肠道组织病理学分级标准
2.ISO20166-3:2022分子病理学检测规范
3.GB/T37837-2019生物样品超薄切片制备方法
4.GB/T39134-2020细胞因子化学发光检测法
5.ISO10993-5:2009体外细胞毒性评价标准
检测设备
1.奥林巴斯BX53显微镜:配备DP27数码相机,实现400至1000多尺度观测
2.徕卡CM1950冰冻切片机:温控精度0.5℃,切片厚度1-50μm可调
3.BioTekSynergyH1酶标仪:支持荧光/化学发光双模式,波长范围200-999nm
4.Agilent2100生物分析仪:DNA/RNA完整性指数(RIN≥7.0)测定
5.ThermoQExactive质谱仪:质量精度<3ppm,动态范围>10⁴
6.MiltenyiGentleMACS组织处理器:程序化处理30种组织类型
7.ZeissLSM900共聚焦显微镜:Z轴分辨率0.35μm,支持多光子成像
8.EppendorfCentrifuge5430R:最大转速15,300rpm,温控范围-20℃至40℃
9.HamiltonSTARlet液体工作站:移液精度CV<1%,支持96/384孔板操作
10.IlluminaNovaSeq6000测序仪:通量6Tb/run,读长2150bp