检测项目
1.菌种鉴定:ITS序列分析(PCR扩增条件:94℃预变性5min;35循环94℃/30s,55℃/30s,72℃/1min)
2.菌丝体生物量:干重测定(精度0.0001g)
3.次生代谢产物:黄酮类含量(HPLC法,C18色谱柱)
4.孢子活性:萌发率测试(25℃/RH85%培养24h)
5.致病性评估:离体叶片侵染实验(接种浓度110⁶CFU/mL)
检测范围
1.香榧种子内生菌分离物
2.香榧叶片表面附着菌群
3.香榧根际土壤微生物群落
4.香榧加工制品(精油/提取物)
5.人工培养菌株保藏样本
检测方法
1.ISO21527:2008《真菌分离培养规范》
2.GB/T30957-2014《食用菌中黄酮类化合物的测定》
3.ASTME2149-2020《抗菌活性动态接触法》
4.GB4789.15-2016《食品微生物学检验霉菌计数》
5.ISO16140-3:2021《分子生物学鉴定方法验证》
检测设备
1.PCR仪(Bio-RadT100ThermalCycler):DNA扩增
2.超高效液相色谱仪(Agilent1260InfinityII):代谢产物分析
3.生物显微镜(OlympusBX53):形态学观察(1000油镜)
4.冷冻干燥机(LabconcoFreeZone2.5L):菌体脱水处理
5.全自动酶标仪(ThermoMultiskanSkyHigh):OD值测定
6.CO₂培养箱(MemmertICO150):恒温恒湿培养
7.超净工作台(ESCOAirstreamClassII):无菌操作
8.基因测序仪(IlluminaMiSeq):16SrRNA测序
9.离心浓缩仪(EppendorfVacufugePlus):样本浓缩
10.生物安全柜(NuAireNU-437-400):病原体处理