检测项目

1.MID1基因全外显子测序：覆盖NM_000381.3参考序列9个外显子区域

2.血清胆固醇代谢物分析：包括7-脱氢胆固醇（7-DHC）浓度测定（正常值＜0.5mg/dL）

3.细胞遗传学核型分析：分辨率≥400条带阶段（ISCN标准）

4.超声心动图评估：重点监测主动脉根部直径Z值（＞2视为异常）

5.神经发育量表测试：采用Bayley-III评估认知/运动/语言发育商（DQ＜70提示迟缓）

检测范围

1.外周血全基因组DNA样本（浓度≥20ng/μL）

2.羊水细胞培养物（孕16-22周取样）

3.新生儿干血斑样本（直径≥8mm）

4.皮肤成纤维细胞原代培养物（传代≤3次）

5.口腔黏膜脱落细胞（保存液为DNA/RNAShield）

检测方法

1.Sanger测序法：依据ISO/IEC17025:2017建立MID1基因突变验证流程

2.GC-MS联用技术：参照GB/T37841-2019进行固醇类代谢物定量分析

3.MLPA技术：采用MRC-HollandP245-B1试剂盒进行基因剂量分析

4.荧光定量PCR：基于GB/T30988-2014建立MID1mRNA表达量测定体系

5.染色体微阵列分析：执行ISCAConsortium标准（分辨率≥60kb）

检测设备

1.IlluminaNovaSeq6000测序系统：全外显子组测序（通量480Gb/run）

2.Agilent7890B-5977BGC-MS系统：固醇代谢物分离鉴定（检出限0.01ng/mL）

3.ThermoFisherQuantStudio5qPCR仪：支持TaqMan探针法绝对定量

4.SiemensAcusonSC2000超声诊断仪：配备C8-4探头（频率4-8MHz）

5.OlympusBX53荧光显微镜：配置DP80双摄像头成像系统

6.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪：13色激光配置（灵敏度＜50MESF）

7.EppendorfMastercyclerX50PCR仪：支持梯度温控（温控精度0.1℃）

8.PerkinElmerJANUSG3工作站：自动化核酸提取（通量96样本/批次）

9.RocheCobasc501生化分析仪：酶法测定总胆固醇（CV＜1.5%）

10.LeicaCM1950冰冻切片机：组织样本制备（切片厚度5-10μm）