检测项目

1.菌核数量测定：采用显微计数法统计每克样本中菌核数量（单位：个/g），粒径范围0.5-5mm

2.病原菌分子鉴定：通过ITS序列分析（引物ITS1/ITS4），PCR扩增产物长度500-700bp

3.致病性验证：离体叶片接种试验（温度202℃，湿度＞90%），记录病斑扩展速率（mm/24h）

4.孢子萌发率检测：水琼脂培养基培养6h后统计萌发率（≥85%为活性合格）

5.抗药性测试：测定EC50值（有效中浓度），参照苯醚甲环唑梯度浓度0.01-10mg/L

检测范围

1.草木樨种子样本（千粒重≥1.8g）

2.植株茎基部病斑组织（取样直径5mm）

3.田间土壤样本（耕作层0-20cm）

4.青贮饲料成品（水分含量≤65%）

5.越冬期菌核样本（低温保存≤4℃）

检测方法

ISO16067-1:2020《植物病原真菌分离培养技术规范》

GB/T3543.4-1995《农作物种子检验规程健康检验》

ASTMD8083-16《土壤中真菌生物量测定标准指南》

NY/T3088-2017《牧草病害诊断技术规程》

SN/T4283.2-2015《出口植物病原真菌检疫鉴定方法》

检测设备

OlympusBX53荧光显微镜（400物镜，DP27成像系统）

Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪（温控精度0.2℃）

SartoriusCP225D电子天平（精度0.01mg）

MemmertHPP750恒温培养箱（温度范围0-70℃，波动度0.3℃）

ThermoScientific1300系列生物安全柜（A2型，30%外排）

Eppendorf5920R高速冷冻离心机（最大转速20,000rpm）

MilliporeMilli-QIQ7000超纯水系统（电阻率18.2MΩcm）

ShimadzuUV-2600i分光光度计（波长范围190-900nm）

LeicaCM1950冷冻切片机（切片厚度1-100μm可调）

ThermoScientificHeratherm烘箱（温度均匀性1.5℃）