检测项目

1.模板DNA浓度测定：紫外分光光度法（A260/A280≥1.8）

2.滚环扩增效率验证：qPCR定量分析（Ct值≤25）

3.产物链长度分布：脉冲场凝胶电泳（10-200kbp分辨率）

4.非特异性结合率：荧光探针杂交法（背景信号≤5%）

5.酶活性验证：放射性标记dNTP掺入实验（≥110^6U/mg）

检测范围

1.质粒DNA：超螺旋结构占比≥90%的闭环载体

2.噬菌体基因组：λDNA/M13mp18标准模板体系

3.病毒载体：AAV/腺病毒环状中间体

4.环状RNA：经T4RNA连接酶处理的闭合结构

5.合成生物学元件：含反向重复序列的工程化环状DNA

检测方法

ISO21571:2005食品微生物学-核酸提取物纯度验证

ASTME2149-13a体外DNA扩增体系效能评估

GB/T34796-2017核酸浓度测定通则（紫外分光光度法）

ISO20395:2018生物技术-核酸定量方法的验证要求

GB/T37873-2019分子生物学检测用标准物质通用要求

检测设备

ThermoFisherNanoDrop8000：双光束紫外/可见分光光度计（1-2μL微量检测）

Agilent2100Bioanalyzer：高灵敏度芯片电泳系统（DNA/RNA完整性分析）

Bio-RadCFX96Touch：实时荧光定量PCR仪（熔解曲线分析功能）

GEHealthcareTyphoonFLA9500：激光共聚焦荧光扫描仪（磷屏成像分辨率10μm）

BeckmanCoulterOptimaXPN-80：超速离心机（最大转速80,000rpm）

PerkinElmerLabChipGXII：微流控毛细管电泳系统（DNA片段大小分级）

SartoriusQuintix2102-1S：百万分之一分析天平（最小称量值0.01mg）

EppendorfMastercyclerX50s：梯度PCR仪（温控精度0.1℃）

BiotekeGenSmartT6：全自动核酸提取工作站（通量96样本/批次）