检测项目

1.菌核形态鉴定：测量菌核直径（0.5-15mm）、颜色（黑色至深褐色）、表面纹理（粗糙/光滑）及剖面结构

2.致病力测定：接种后72小时测量病斑扩展速率（mm/h），统计侵染率（%）

3.毒素成分分析：检测草酸含量（≥3.5mmol/L）、细胞壁降解酶活性（PG≥15U/mL）

4.分子生物学检测：PCR扩增ITS序列（引物SS1/SS2），电泳条带比对（500-600bp）

5.抗药性监测：测定菌株对腐霉利EC50值（0.05-2.8μg/mL），判定抗性等级

检测范围

1.新鲜鸭芹植株：茎基部褐变组织样本

2.储存期块茎：表面附着菌核的仓储样品

3.栽培基质：含菌核的土壤/有机肥混合物

4.种子材料：带菌率≥0.3%的播种用种

5.农产品加工品：干制茎叶中的菌核残留物

检测方法

ISO16140-3:2021食品链微生物学-方法验证（致病菌分离培养）

GB/T36852-2018植物病原真菌实时荧光PCR检测通则

ASTME2275-19植物病原体分子诊断标准指南

NY/T401-2000种子带菌率检验规程

SN/T1809-2006进出境植物及其产品中核盘菌检疫鉴定方法

检测设备

1.OlympusBX53荧光显微镜：菌核显微形态观察（400）

2.ThermoNanoDropOne紫外分光光度计：DNA浓度测定（A260/A280比值）

3.Bio-RadT100PCR仪：ITS基因扩增（退火温度58℃）

4.Agilent1260HPLC系统：草酸定量分析（C18色谱柱）

5.MemmertICP600培养箱：病原菌分离培养（201℃）

6.SartoriusCP225D电子天平：培养基称量（精度0.01mg）

7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机：菌体收集（12000rpm）

8.LI-COROdyssey成像系统：WesternBlot检测（700nm通道）

9.METTLERTOLEDOSevenExcellencepH计：培养基pH值校准（0.01）

10.ThermoScientificHeratherm烘箱：样本预处理（105℃灭菌）