检测项目
1.病原菌分离培养:采用PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂),培养温度281℃,菌落直径测量精度0.1mm
2.菌核密度测定:单位体积土壤(100cm)中菌核数量统计,分级标准≥5个/cm为高风险
3.土壤pH值检测:电极法测定范围4.0-8.0,分辨率0.01pH单位
4.致病性验证:离体叶片接种试验(接种量10⁴孢子/mL),病斑扩展速率测量
5.抗药性监测:苯醚甲环唑EC50值测定(浓度梯度0.1-100μg/mL)
检测范围
1.柑桔属植物根际土壤样本(深度0-30cm)
2.染病植株茎基部皮层组织(取样面积≥2cm)
3.苗圃嫁接苗木接口部位(苗龄≤1年)
4.果园灌溉水样(过滤孔径0.45μm)
5.果实贮藏期包装材料(瓦楞纸板及木制容器)
检测方法
1.ISO21427:2018《植物病原真菌分离培养规范》
2.GB/T28084-2011《植物检疫性真菌检测规程》
3.ASTMD4972-19《土壤微生物活性标准测试方法》
4.NY/T401-2000《果树苗木病毒检测技术规程》
5.SN/T1840-2016《植物病原真菌实时荧光PCR检测方法》
检测设备
1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(检测限10拷贝/μL)
2.OlympusCX43生物显微镜(1000油镜观察菌丝隔膜结构)
3.SartoriusCP225D电子天平(称量精度0.01mg)
4.MemmertIPP400培养箱(温度波动0.3℃)
5.Eppendorf5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)
6.Metrohm902pH计(自动温度补偿功能)
7.BioTekSynergyH1酶标仪(波长范围200-999nm)
8.LeicaCM1950冰冻切片机(切片厚度5-50μm可调)
9.NikonSMZ25体视显微镜(20光学变倍比)
10.ThermoScientificHeratherm烘箱(温度均匀性1.5%)