检测项目

1.活菌定量与分类检测:总活菌计数、特定功能菌群(如产丁酸盐菌)活菌数、严格厌氧菌与兼性厌氧菌比例。

2.微生物代谢活性检测:短链脂肪酸(如乙酸、丙酸、丁酸)产量测定、酶活性(如β-葡萄糖苷酶、脲酶)评估、气体(氢气、甲烷)生成量分析。

3.菌群结构与活力分析:基于活细胞标记的菌群组成分析、细菌增殖活力检测、细胞膜完整性评估。

4.病原微生物筛查:潜在致病菌(如艰难梭菌、沙门氏菌、志贺氏菌)的活性检测、产毒基因携带菌的活菌鉴定。

5.抗生素抗性基因与转移活性:可移动遗传元件介导的抗性基因水平转移潜力评估、抗性菌活细胞占比分析。

6.免疫调节活性评估:样本刺激免疫细胞(如外周血单个核细胞)产生细胞因子(如IL-10, TNF-α)的能力检测。

7.细胞功能活性检测:细菌粘附上皮细胞能力、生物膜形成活性、群体感应信号分子检测。

8.制剂稳定性与保存后活性:冻存复苏后活菌率测定、不同保存条件下细胞活性衰减动力学分析。

9.噬菌体活性检测:溶原性噬菌体诱导分析、针对特定细菌的裂解活性测定。

10.真核微生物活性筛查:活性真菌(如酵母菌)计数、原生动物活力评估。

检测范围

健康供体新鲜粪便样本、经过处理的粪菌移植悬液、冻存复苏后的粪菌制剂、模拟消化液处理后的菌液、移植前受体基线粪便样本、移植后不同时间点受体粪便样本、用于质量控制的参考菌株培养物、制剂制备中间产物、不同稀释浓度的移植样本、厌氧环境保存的样本、用于功能验证的特定菌群共培养物、样本保存液、过滤除菌后的上清液、菌体沉淀重悬液

检测设备

1.流式细胞仪:用于快速、高通量地对样本中的微生物细胞进行活死染色区分、计数及特定种群分选;结合荧光探针可分析细胞周期、膜电位等功能状态。

2.厌氧工作站:为严格厌氧微生物的处理、培养和活性分析提供无氧环境;确保检测过程中菌群活性不受氧气暴露的影响。

3.实时荧光定量聚合酶链式反应仪:对经过活性染料预处理(如叠氮溴化丙锭)的样本进行核酸检测,选择性定量具有完整细胞膜的活微生物的特定基因。

4.气相色谱仪:精确测定样本中微生物代谢产生的短链脂肪酸等挥发性物质的种类与浓度;用于评估菌群的整体代谢功能活性。

5.酶标仪:用于进行基于比色法或荧光法的细胞活性检测,如脱氢酶活性检测、细胞增殖与毒性测试;可高通量分析样本对宿主细胞的免疫调节作用。

6.激光共聚焦显微镜:对经过多重荧光标记的样本进行高分辨率三维成像;可直观观察微生物在生物膜中的空间分布与活性状态。

7.微生物生长曲线分析仪:通过连续监测培养液的光密度或浊度,自动绘制微生物的生长曲线;用于评估菌群的增殖活力与生长动力学。

8.超高效液相色谱串联质谱联用仪:高灵敏度地鉴定与定量样本中微量的微生物代谢产物、信号分子及抗生素残留;用于深入的功能活性分析。

9.脉冲场凝胶电泳系统:用于分离大分子量基因组脱氧核糖核酸;结合活性细胞处理,可分析活菌群中质粒及可移动元件的存在情况。

10.细胞培养与共培养系统:提供可控的体外细胞培养环境,用于评估粪菌样本与肠道上皮细胞或免疫细胞互作时的功能活性与细胞效应。