检测项目

1. 免疫组化染色:CD20、CD3、CD10、BCL-2、BCL-6、MUM1、Ki-67(阈值≥30%判定高增殖活性)

2. 荧光原位杂交(FISH):MYC基因断裂(8q24)、BCL-2(18q21)、BCL-6(3q27)重排

3. 流式细胞术:表面标记CD19/CD20/CD22/CD45表达强度(阳性率≥20%)

4. PCR基因重排分析:IGH@/IGK@/IGL@克隆性重排(FR1/JH引物体系)

5. 二代测序(NGS):TP53、MYD88 L265P、EZH2等基因突变(覆盖深度≥500×)

检测范围

1. 淋巴结活检组织(石蜡包埋切片≥4μm厚度)

2. 骨髓穿刺液(有核细胞数≥1×10⁶/mL)

3. 外周血样本(EDTA抗凝管采集≥5mL)

4. 脑脊液标本(离心后细胞沉淀≥0.5mL)

5. 细针穿刺细胞学样本(液基保存液≥10mL)

检测方法

1. 免疫组化染色:ISO 1920-3:2019组织处理规范

2. FISH技术:GB/T 30988-2014荧光原位杂交操作规程

3. 流式细胞术:CLSI H43-A2标准方案

4. PCR扩增:WS/T 420-2013基因重排分析指南

5. NGS建库:ISO/IEC 17025:2017测序文库制备要求

检测设备

1. Leica BOND-III全自动免疫组化仪(抗原修复温度97℃±1℃)

2. Zeiss Axio Imager M2荧光显微镜(DAPI/FITC/TRITC三通道滤光片)

3. BD FACSCanto II流式细胞仪(488nm/640nm双激光系统)

4. Thermo Fisher QuantStudio 5实时PCR仪(96孔模块温控精度±0.1℃)

5. Illumina NextSeq 550Dx测序平台(双流动槽最大产出120Gb)

6. Roche BenchMark ULTRA全自动染色机(20试剂位独立温控)

7. Agilent 2100生物分析仪(DNA片段分析范围35-7500bp)

8. Hamilton STARlet液体处理工作站(移液精度CV≤1.5%)