肿瘤干细胞检测

检测项目

1. 表面标志物检测：CD44、CD133、EpCAM等特异性抗原表达水平（流式细胞术定量分析）

2. 自我更新能力评估：成球实验（Sphere-forming efficiency≥0.1%）及克隆形成率（Soft agar colony≥50μm）

3. 耐药性测试：ABCG2转运蛋白活性（罗丹明123外排率≥80%）及化疗药物IC50值测定

4. 分化潜能分析：多向分化标志物（β-III Tubulin/GFAP/Osteocalcin）表达谱监测

5. 致瘤性验证：NOD/SCID小鼠体内移植瘤形成实验（最低接种量≤10³ cells）

检测范围

1. 实体瘤组织样本（乳腺癌/胶质瘤/结直肠癌等新鲜或冻存标本）

2. 外周血/骨髓液循环肿瘤细胞富集产物

3. 原代肿瘤细胞培养物（传代≤P5）

4. 肿瘤细胞系亚群分选样本（CD44+/CD24-等表型）

5. 类器官/PDX模型衍生细胞悬液

检测方法

1. ISO 10993-5:2009 细胞毒性体外评价法（MTT/XTT比色法）

2. GB/T 30988-2014 多能干细胞鉴定方法

3. ASTM F2944-12 流式细胞术标准化操作规范

4. ISO 20391-1:2018 细胞计数与活力测定指南

5. GB/T 39730-2020 细胞表面标志物免疫荧光检测通则

检测设备

1. 流式细胞仪（BD FACSAria III）：多色荧光分析及细胞分选功能（18参数/4激光）

2. 激光共聚焦显微镜（ZEISS LSM 980）：三维成像与活细胞动态追踪系统

3. 实时荧光定量PCR仪（ABI QuantStudio 7 Pro）：TaqMan探针法基因表达分析

4. 高内涵成像系统（PerkinElmer Operetta CLS）：表型筛选与自动图像采集模块

5. 超高效液相色谱（Waters ACQUITY UPLC H-Class）：药物代谢产物定量分析

6. 生物分子相互作用仪（Biacore X100）：表面等离子共振技术测定结合亲和力

7. 全自动细胞计数仪（Nexcelom Cellometer X4）：台盼蓝排除法活率测定

8. IVIS Lumina III活体成像系统：生物发光示踪与定量分析

9. Seahorse XFe96代谢分析仪：线粒体呼吸链功能实时监测

10. Nanodrop One超微量分光光度计：核酸/蛋白浓度快速测定