替雷利珠单抗注射液检测

检测项目

1.生物活性测定：采用细胞增殖抑制法测定效价（IC50值范围：0.1-10nM），相对活性≥80%

2.纯度分析：SEC-HPLC法测定高分子量物质（≤3.0%）、单体含量（≥95.0%）

3.含量测定：RP-HPLC法测定替雷利珠单抗浓度（标示量90.0%-110.0%）

4.残留杂质：ELISA法检测宿主细胞蛋白残留（≤100ppm）、ProteinA残留（≤10ppm）

5.无菌检查：薄膜过滤法培养14天（需符合《中国药典》无菌检查法）

检测范围

1.原料药（DS）：冻干粉针的生物活性、二级结构及热稳定性分析

2.成品制剂（DP）：注射液可见异物、不溶性微粒及pH值（5.0-7.0）检测

3.辅料成分：聚山梨酯80含量测定（HPLC法）及氧化产物监控

4.包材相容性：西林瓶可提取物研究（GC-MS鉴定硅油迁移量）

5.中间产品：原液电荷异质性检测（CE-SDS法测定酸性/碱性峰比例）

检测方法

1.生物活性：参照USP<1032>建立报告基因法（NF-κB信号通路激活试验）

2.纯度分析：执行GB/T40146-2021《重组抗体类药品纯度测定方法》

3.残留DNA：按《中国药典》四部3407外源性DNA残留量测定法（qPCR阈值≤10ng/剂）

4.内毒素检测：凝胶法符合GB/T14233.2-2005医疗器械生物学评价标准

5.亚可见微粒：符合ISO8871-1:2003弹性体部件释放颗粒测试规范

检测设备

1.高效液相色谱仪（Agilent1260InfinityII）：配备DAD检测器进行纯度分析

2.流式细胞仪（BDFACSCantoII）：用于细胞表面PD-1结合率测定

3.微量残余气体分析仪（SBIRGA300）：西林瓶顶空氧含量测定（精度0.01%）

4.动态光散射仪（MalvernZetasizerPro）：蛋白质粒径分布分析（0.3nm-10μm）

5.UPLC-QTOF系统（WatersXevoG2-XS）：宿主细胞蛋白鉴定（质量精度<5ppm）

6.全自动酶标仪（PerkinElmerEnVision）：ECL发光法检测残留ProteinA

7.激光衍射粒度仪（BeckmanCoulterLS13320）：不溶性微粒统计（≥10μm/≥25μm）

8.近红外光谱仪（ThermoAntarisII）：原液浓度快速筛查模型建立

9.离子色谱仪（DionexICS-600）：制剂中钠离子/枸橼酸根平衡监测

10.自动微生物培养系统（BDBACTECFX40）：无菌检查快速培养（阳性检出限≤1CFU）