检测项目

1.红细胞外期疟原虫核酸载量:采用qPCR定量分析18SrRNA基因拷贝数(检测限≤10copies/μL)

2.裂殖子表面蛋白MSP-1抗原浓度:ELISA法测定阈值≥0.5IU/mL

3.休眠体(hypnozoite)形态学鉴定:吉姆萨染色镜检分辨率≥1000

4.肝期疟原虫代谢活性:ATP生物荧光法灵敏度≤110^3parasites/mL

5.抗药性基因突变筛查:包括Kelch13C580Y突变位点Sanger测序分析

检测范围

1.全血样本(EDTA抗凝管采集量≥2mL)

2.肝组织穿刺物(福尔马林固定石蜡包埋样本)

3.体外培养的肝细胞模型(HepG2/Huh7细胞系)

4.抗疟药物体外抑制试验样本(IC50测定浓度梯度≥5个)

5.媒介按蚊唾液腺解剖样本(解剖显微镜下分离腺体组织)

检测方法

ISO15189:2022《医学实验室质量和能力要求》第7.3条寄生虫学检验规范

GB/T31746-2015《疟原虫检测实时荧光PCR方法》核酸扩增程序

WHO《疟疾显微镜诊断质量保证手册》(第二版)形态学判读标准

ASTME2148-16《体外测定抗疟药物活性的标准试验方法》

WS/T471-2015《疟疾诊断标准》临床样本处理规程

检测设备

ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法多重扩增

OlympusBX53荧光显微镜:配置DP73数码相机及CellSens分析软件

SysmexXN-9000全自动血液分析仪:具备异常细胞散射图报警功能

BDFACSCantoII流式细胞仪:配备405/488/640nm三激光系统

RocheCobase601电化学发光分析仪:HRP-II抗原定量检测模块

EppendorfCentrifuge5430R冷冻离心机:最大RCF30,000g

BioTekSynergyH1微孔板读数仪:支持荧光/化学发光双模式检测

SartoriusQuintix精密天平:称量精度0.01mg级标准物质配制

TecanFreedomEVOlyzer全自动酶标处理系统:集成洗板/孵育功能模块

LeicaCM1950冰冻切片机:制备10μm厚肝组织切片样本