可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型典型应用场景主要检测项目常用方法 / 参考
化妆品美白功效原料水溶性美白活性物的体外抑制筛选酪氨酸酶抑制率、抑制类型判别、抑制常数Ki、残余活性百分数T/SHRH 015-2018《化妆品-酪氨酸酶活性抑制实验方法》；分光光度法动力学监测
食品与功能食品原料降糖功能成分的体外抑制评价α-葡萄糖苷酶抑制率、抑制类型、Ki估算无专属国标，按协议口径执行；405nm对硝基酚产物定量
饲料原料与豆制品大豆抗营养因子控制与加工工艺评价胰蛋白酶抑制剂活性、胰蛋白酶抑制因子残留量GB/T 46002-2025《动物饲料 大豆及其加工产品中胰蛋白酶抑制剂活性测定》；GB/T 40368-2021酶联免疫吸附法
蔬菜、茶叶与肉类农产品有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速筛检胆碱酯酶抑制率、抑制率分级判读GB/T 18630-2002、GB/T 18625-2002、GB/T 18626-2002（酶抑制法）
化学品与农药活性物内分泌干扰作用的筛选评价芳香酶抑制活性、雌激素与雄激素活性相关指标GB/T 35515-2017（鱼类体内筛选试验）
卫生害虫防控样品蚊虫、家蝇、德国小蠊种群抗药性监测不敏感乙酰胆碱酯酶个体检出率GB/T 26348-2010、GB/T 26349-2010、GB/T 26351-2010
医药中间体与天然产物提取物抑制剂候选物体外初筛与抑制机制研究抑制类型四分型判读、Ki、时间依赖性抑制判别协议口径；初速率法与双倒数作图联用

检测项目

1. 抑制类型判别：竞争性、非竞争性、反竞争性、混合型四类，依据多底物浓度梯度下双倒数图形特征判读，直线族交于纵轴提示竞争性，交于横轴提示非竞争性，平行线组提示反竞争性

2. 抑制常数Ki测定：竞争性抑制按Cheng-Prusoff关系IC50=Ki×(1+[S]/Km)换算，底物浓度等于Km时IC50为Ki的2倍，Ki对可逆抑制不随底物浓度与检测条件改变

3. 初速率条件验证：底物消耗控制在起始浓度的10%以内，产物生成量对时间呈线性，取线性段斜率作为反应速率

4. 时间依赖性抑制判别：比较预孵育前后抑制程度变化，经高倍稀释或透析处理后活性恢复提示可逆抑制，活性不能恢复且随预孵育时间加深提示不可逆失活

5. 残余活性与活性保持率：以不含抑制剂的平行对照为100%基准，报告不同抑制剂浓度下的相对活性百分数

检测范围

1. 靶酶体系：酪氨酸酶、α-葡萄糖苷酶、胰蛋白酶、乙酰胆碱酯酶、芳香酶等

2. 抑制剂样品：小分子合成物、天然产物提取物、多肽类候选物等

3. 复配体系：化妆品美白复配原料、功能食品复配成分等

4. 农产品基质：蔬菜、茶叶、肉类等农残筛检对象

5. 饲料与加工制品：大豆粕、膨化大豆、发酵豆制品等

检测方法

1. GB/T 35515-2017 化学品 鱼类雌激素、雄激素和芳香酶抑制活性试验方法

2. GB/T 46002-2025 动物饲料 大豆及其加工产品中胰蛋白酶抑制剂活性测定

3. GB/T 40368-2021 植物代谢产物胰蛋白酶抑制因子测定 酶联免疫吸附法

4. GB/T 18630-2002 蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯农药残留量的简易检验方法（酶抑制法）

5. GB/T 26348-2010 蚊虫抗药性检测方法 不敏感乙酰胆碱酯酶法

6. T/SHRH 015-2018 化妆品-酪氨酸酶活性抑制实验方法

检测设备

1. 紫外-可见分光光度计(安捷伦Cary 3500)：双光束，8池恒温池架，波长范围190~900nm，控温8~55℃，适合多浓度梯度连续动力学监测

2. 紫外可见分光光度计(岛津UV-1900i)：波长范围190~1100nm，双光束光学系统

3. 酶标仪(赛默飞Varioskan LUX)：吸收波长200~1000nm，具备荧光检测、内置温控与振荡功能，适合批量剂量反应试验

4. 荧光分光光度计(日立F-7100)：激发与发射波长200~900nm，用于辅酶偶联体系的荧光动力学监测

5. 高效液相色谱仪(岛津LC-2050C)：二元高压梯度，流速0.001~3mL/min，用于底物消耗与产物生成的色谱定量

6. 多通道移液器(艾本德Research plus)：8道与12道配置，量程0.5~1200微升，保障剂量反应加液一致性

7. 恒温孵育摇床(赛默飞MaxQ 8000)：控温范围室温+5~80℃，转速25~400rpm，用于预孵育时间控制

8. 高速冷冻离心机(艾本德5427 R)：转速16000rpm级，温控-10~40℃，用于酶液与基质提取液澄清

9. pH计(梅特勒FE28)：量程-2.000~19.999pH，分辨率0.01pH，用于反应缓冲液校核