可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 农田耕层土壤 | 大田作物根围(0-20cm耕层)菌根侵染评价与培肥决策 | 丛枝菌根真菌孢子密度、真菌孢子总数、镰刀菌厚垣孢子密度 | 湿筛倾析-显微镜计数法;稀释平板培养计数法(CFU/g干土);HJ 613-2011干土换算 |
| 林地与草地土壤 | 人工林、天然草甸、退耕还草地生态恢复成效评价 | AMF孢子密度与大小分级、孢子类群丰度、微生物生物量碳 | 蔗糖密度梯度离心-显微计数;GB/T 39228-2020熏蒸提取法 |
| 果园与经济作物根围土 | 柑橘、葡萄、苹果、茶树根围土壤健康诊断与连作障碍分析 | 孢子密度、季节动态监测、球囊霉素相关蛋白(GRSP) | 湿筛倾析法;Bradford蛋白定量法联动测定 |
| 设施农业与育苗基质 | 温室大棚耕层土、无土育苗基质、复配营养土生物安全评估 | 病原真菌孢子(镰刀菌、疫霉、腐霉)、真菌孢子总数 | 选择性培养基平板计数;湿筛镜检形态学确认 |
| 修复与复垦土壤 | 矿区复垦、污染场地修复效果的生物学指标跟踪 | 孢子密度(恢复评价指标)、孢子萌发率、污染物毒性效应 | GB/T 32721-2016孢子萌发试验;显微镜直接计数 |
| 草坪与绿化种植土 | 城市绿地、运动场草坪、道路绿化带土壤质量评价 | 真菌孢子总数、AMF孢子密度、土壤含水率干土换算 | 平板计数法;HJ 613-2011重量法 |
| 科研试验土壤 | 盆栽试验、田间定位试验、根箱模拟研究的动态取样 | 孢子密度动态监测、孢子活力染色、孢子壁厚分级 | 台盼蓝与TTC染色;血球计数板定量 |
检测项目
1. AMF(丛枝菌根真菌)孢子密度:0.1-120个/g干土(10-12000个/100g干土),湿筛倾析后显微镜全皿计数
2. 真菌孢子总数:10²-10⁶ CFU/g干土,孟加拉红培养基25℃倒置培养5-7天菌落计数
3. 镰刀菌厚垣孢子等病原孢子密度:10-10⁴个/g干土,选择性培养基分离结合形态学镜检鉴定
4. 孢子大小分级:小于100μm、100-250μm、250-500μm、大于500μm四级,目镜测微尺测量
5. 孢子活力率:TTC四唑染色法,活孢子内脱氢酶还原显色,活力率以百分比报告
6. 干土换算基数:土壤含水率按105℃烘干至恒重测定,全部结果折算为每克烘干土报告
检测范围
1. 粮食作物根围土:水稻、小麦、玉米、大豆、马铃薯根际0-20cm耕层土壤
2. 经济林果根围土:柑橘、葡萄、苹果、梨、茶树、香蕉根围土壤
3. 林草生态土壤:人工林地、天然草甸、退耕还草地、矿山复垦土壤
4. 设施园艺基质:温室大棚耕层土、商品育苗基质、复配营养土、菇渣堆肥掺混土
5. 科研与修复试验土:盆栽与田间定位试验土、根箱模拟土、污染修复效果评价土
检测方法
1. 湿筛倾析-显微镜计数法:20g土样浸泡分散后经0.5mm至38μm(400目)套筛湿筛,筛上物收集后全皿镜检计数(经典Gerdemann-Nicolson流程)
2. 蔗糖密度梯度离心法:45%-60%蔗糖介质中2000r/min离心3-5min,孢子富集于界面层后收集计数
3. GB/T 32721-2016 污染物对菌根真菌的影响 孢子萌发试验
4. GB/T 39228-2020 土壤微生物生物量的测定 熏蒸提取法
5. HJ 613-2011 土壤 干物质和水分的测定 重量法
6. HJ/T 166-2004 土壤环境监测技术规范与GB/T 36197-2018 土壤质量 土壤采样技术指南,规范布点采样与样品流转
7. 稀释平板培养计数法:10⁻¹-10⁻⁴梯度稀释,PDA与孟加拉红培养基25℃培养5-7天后计数
检测设备
1. 生物显微镜:放大40-1000倍,配10×、40×、100×物镜及显微成像系统
2. 体视显微镜:7.5-75倍连续变倍,工作距离110mm,用于孢子挑取与形态初筛
3. 高速离心机:转速500-6000r/min,4×100mL角式转子,转速控制精度±50r/min
4. 恒温培养箱:温度10-60℃,控温精度±0.5℃,霉菌培养条件25℃±1℃
5. 往复式振荡器:频率50-300r/min,用于土样分散洗涤
6. 土壤标准套筛:孔径0.5mm、0.25mm、106μm、63μm、38μm不锈钢筛组
7. 血球计数板:0.1mm深度,25×16型,孢子悬液定量计数
8. 鼓风干燥箱:室温-300℃,105℃烘干测定土壤含水率
9. 高压蒸汽灭菌锅:121℃、0.15MPa,培养基与器皿灭菌
10. 超净工作台:洁净度百级,用于平板接种与梯度稀释操作