检测项目

需氧菌总数计数：

  • 平板计数法：菌落形成单位/克或毫升、培养温度30-35°C（参照USP<61>）
  • 膜过滤法：过滤体积100ml、孔径0.45μm
  • 表面涂布法：接种量0.1ml、培养基TSA
霉菌和酵母菌计数：
  • 倾注法：菌落计数、培养温度20-25°C（参照EP2.6.12）
  • 点植法：菌落直径测量、培养基SDA
  • 膜过滤法：过滤体积50ml、培养时间5天
控制菌检查：
  • 大肠埃希菌检测：选择性培养基MacConkey、确认试验（参照ISO16654）
  • 沙门菌检测：增菌培养STEP、血清学鉴定
  • 金黄色葡萄球菌检测：Baird-Parker琼脂、凝固酶试验（参照GB4789.10）
厌氧菌计数：
  • 厌氧培养法：菌落总数、气体环境5%CO2（参照USP<62>）
  • 膜过滤厌氧法：过滤体积50ml、培养温度37°C
耐热菌计数：
  • 热处理方法：80°C处理10分钟、后续培养
  • 芽孢计数：培养基TSB、培养条件55°C
酵母菌专项计数：
  • 特定培养基法：YM琼脂、菌落形态鉴定
  • 膜过滤酵母法：过滤体积25ml、培养时间72小时
霉菌专项计数：
  • 表面采样法：接触平板、菌落直径≥2mm计数
  • 倾注霉菌法：培养基DG18、培养温度25°C
指示菌检测：
  • 肠杆菌科计数：VRBGA培养基、确认试验
  • 大肠菌群检测：LST肉汤、MPN法
致病菌筛查：
  • 李斯特菌检测：Oxford琼脂、生化鉴定（参照ISO11290）
  • 铜绿假单胞菌检测：Cetrimide琼脂、氧化酶试验
环境监测：
  • 空气沉降菌：接触平板法、培养时间48小时（参照ISO14698）
  • 表面擦拭菌：棉签采样、洗脱体积10ml
  • 水质微生物：膜过滤法、孔径0.22μm

检测范围

1.注射用药品：无菌制剂如注射液，重点检测细菌内毒素和控制菌如金黄色葡萄球菌，确保无微生物污染。

2.口服固体制剂：包括片剂和胶囊，重点检测需氧菌总数和霉菌酵母菌总数，评估原料污染风险。

3.外用制剂：如软膏和乳膏，重点检测微生物限度和控制菌，防止皮肤感染风险。

4.食品原料：包括乳制品和肉类，重点检测总菌落计数和致病菌如沙门菌，保障食品安全。

5.化妆品：如乳液和香水，重点检测霉菌酵母菌总数和指示菌，评估防腐效能。

6.医疗器械：如导管和纱布，重点检测表面微生物污染和生物负载，确保无菌屏障。

7.饮用水：包括瓶装水和自来水，重点检测总大肠菌群和耐热菌，符合卫生标准。

8.饲料产品：如动物饲料，重点检测霉菌计数和沙门菌，防止动物疾病传播。

9.包装材料：如塑料瓶和铝箔，重点检测表面擦拭菌和空气沉降菌，验证无菌包装完整性。

10.环境样品：包括洁净室空气和水质，重点检测空气沉降菌和总需氧菌，监控生产环境洁净度。

检测方法

国际标准：

  • USP<61>Microbialenumerationtests（平板法和膜过滤法差异：USP指定TSA培养基，培养时间48小时）
  • EP2.6.12Microbiologicalexaminationofnon-sterileproducts（表面涂布法差异：EP要求培养温度20-25°C，USP为30-35°C）
  • ISO4833-1Microbiologyofthefoodchain—Horizontalmethodfortheenumerationofmicroorganisms（倾注法差异：ISO使用PCA培养基，与USP的TSA不同）
  • ISO16654Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs—HorizontalmethodforthedetectionofEscherichiacoliO157（控制菌检测差异：ISO强调免疫磁分离法）
国家标准：
  • 中国药典2020版通则1105微生物限度检查法（平板计数法差异：药典规定培养温度30-35°C，与ISO的25°C不同）
  • GB4789.2食品微生物学检验菌落总数测定（倾注法差异：GB要求培养时间48小时，EP为72小时）
  • GB4789.4食品微生物学检验沙门菌检验（增菌培养差异：GB使用SC增菌液，ISO用BPW）
  • GB15979一次性使用卫生用品卫生标准（表面采样法差异：GB指定棉签擦拭体积，国际标准无此规定）

检测设备

1.生化培养箱：INC-200型（温度范围0-60°C，精度±0.5°C）

2.生物安全柜：BSC-100型（洁净度等级100，气流速度0.5m/s）

3.显微镜：MIC-500型（放大倍数40-1000X，分辨率0.2μm）

4.菌落计数器：COL-300型（自动计数功能，精度±1%）

5.膜过滤装置：FIL-150型（孔径0.45μm，过滤面积47mm）

6.高压灭菌器：STM-250型（温度121°C，压力15psi，容积50L）

7.冰箱：REF-400型（温度-20至4°C，容积200L）

8.水浴锅：WAT-100型（温度范围室温至100°C，精度±0.1°C）

9.pH计：PH-700型（测量范围0-14，精度±0.01）

10.分析天平：BAL-600型（量程0-500g，精度0.001g）

11.离心机：CEN-800型（转速0-10000rpm，容量6×50ml）

12.振荡器：SHA-200型（频率50-300rpm，振幅25mm）

13.空气采样器：AIR-120型（流量28.3L/min，采样时间5分钟）

14.紫外可见分光光度计：UVS-1800型（波长范围190-900nm，带宽1nm）

15.自动稀释器：DIL-100型（稀释比例1:10至1:1000，精度±1%）