检测项目

1. 耐药基因检出(靶基因blaCTX-M、mecA、vanA等定性检测)

2. 突变位点分析(结核杆菌rpoB利福平耐药突变点81位点)

3. 基因型-表型符合率(%,符合率≥85%判定一致性良好)

4. 多重耐药基因(MDR/XDR结核耐药基因kFP检测)

5. 耐药基因定量(Ct值,qPCR法,阳性判定Ct≤38)

检测范围

1. 革兰阳性菌耐药:MRSA的mecA/femA基因及VRE的vanA/B基因

2. 革兰阴性菌耐药:ESBLs(blaCTX-M/TEM/SHV)及碳青霉烯酶

3. 结核分枝杆菌耐药:利福平rpoB、异烟肼katG/inhA基因

4. 肠杆菌科MLST:产KPC/NDM碳青霉烯酶耐药基因

5. 真菌耐药:念珠菌ERG11氟康唑耐药基因

检测方法

1. WS/T 203-2020 临床微生物实验室抗菌药物敏感性试验

2. CLSI M100-Ed33 临床抗菌药物敏感性试验执行标准

3. 《国家细菌耐药监测网技术方案》2022年版

4. WHO 针对结核分枝杆菌耐药监测指南

5. GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求

检测设备

1. 实时荧光定量PCR仪(ABI 7500 Fast):96孔板,5通道检测

2. 全自动核酸提取仪(Maxwell RSC):磁珠法提取,通量16样本

3. 基因测序仪(Illumina MiSeq):二代测序,测耐药基因突变

4. 微量移液器(Eppendorf 0.5-1000μL全套):精度±1%

5. 生物安全柜(BSC-1300 ⅡA2):洁净度ISO 5级

6. PCR扩增仪(BioRad T100):温度4-99℃,升降温速率3℃/s

7. 电泳仪(DYY-6C):电压0-300V,配凝胶成像系统

8. 微波炉/水浴装置:试剂加热及模板变性

9. 高速冷冻离心机(5424R):转速0-15000rpm,温控4-40℃