可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
食品与益生菌分离株 乳酸菌饮品、发酵乳、固体饮料中益生菌菌种确认与批次一致性核查 菌落形态、革兰染色、过氧化氢酶试验、生化图谱、16S rRNA基因测序 GB 4789.35-2016；GB 4789.28-2013 培养基与试剂质量要求
食源性致病菌分离株 沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌阳性菌落的种属确认与污染溯源 生化鉴定、血清学分型、基因测序复核、毒力基因筛查 GB 4789.4-2016；GB 4789.10-2016；GB 4789.38-2012
药品与化妆品控制菌 非无菌产品微生物限度检查中分离的控制菌确认、污染菌实验室调查 分离纯化、染色镜检、鉴定到种、耐药特征初筛 中国药典2020年版四部通则1106；《化妆品安全技术规范》微生物章节
环境与水体微生物 洁净室沉降菌与浮游菌、纯化水与工艺用水分离菌的种群确认 菌落纯培养、形态学观察、质谱或测序鉴定 GB/T 16294-2010；GB/T 5750.12-2023
农用与土壤微生物 微生物菌剂功能菌登记复核、根际促生菌与生防菌分类地位确认 16S rRNA测序、固氮溶磷功能性状验证、杂菌污染判定 GB 20287-2006 农用微生物菌剂
发酵工业菌种 酿酒酵母、曲霉、乳酸菌发酵剂的纯度复核与菌种退化监测 细胞形态与出芽繁殖观察、测序比对、存活率与发酵活力复核 ISO 7218:2007 微生物学检验通用指南；菌种保藏规范

检测项目

1. 菌种纯度确认：单菌落连续划线纯化2-3次，镜检细胞形态一致，确认无杂菌混杂

2. 革兰染色与形态学鉴定：结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、沙黄复染流程，油镜1000倍观察细胞形状与排列

3. 生化代谢图谱鉴定：糖发酵与酶活性等20-49项生化反应，30-37℃孵育4-24小时读数比对

4. 质谱指纹图谱鉴定：核糖体蛋白质量范围2-20kDa，匹配分值≥2.0判定种水平，1.7-2.0判定属水平

5. 16S rRNA基因测序：通用引物扩增约1500bp片段，序列相似性≥98.65%判定同种，≥94.5%判定同属

6. 真菌内转录间隔区测序：种间分辨率高，相似性≥99%一般判定种水平，可配合大亚基D1/D2区复核

检测范围

1. 细菌类群：肠杆菌科、芽孢杆菌属、假单胞菌属、微球菌科、乳酸菌属等

2. 酵母类群：酿酒酵母、假丝酵母、毕赤酵母、红酵母等

3. 丝状真菌：曲霉、青霉、根霉、毛霉及食用菌培养物污染杂菌

4. 放线菌：链霉菌属及其近缘属，多见于生防与产抗生素菌株

5. 益生菌产品分离株：双歧杆菌、乳杆菌、酪酸梭菌等

6. 环境分离株：洁净室沉降菌、空气浮游菌、水体与土壤微生物纯培养物

检测方法

1. GB 4789.28-2013 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求

2. GB 4789.35-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验

3. GB/T 5750.12-2023 生活饮用水标准检验方法 第12部分：微生物指标

4. GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范 食品微生物检测

5. GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求

6. ISO 7218:2007 食品和动物饲料微生物学 微生物学检验的一般要求和指南

检测设备

1. 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪：质量范围2-20kDa，菌种参考数据库覆盖常见菌种2000种以上

2. 全自动微生物鉴定药敏分析系统：板卡式生化反应，孵育温度30-37℃，4-24小时出具鉴定图谱

3. 梯度PCR扩增仪：温度范围4-99℃，最大升温速率6℃/s，96孔反应模块

4. 毛细管电泳测序仪：8道毛细管，单次读长800-1000bp，碱基识别准确率99%以上

5. 生物显微镜（配成像系统）：放大倍数40-1000倍，油镜数值孔径1.25，带相差与暗视野模块

6. A2型生物安全柜：下降风速0.25-0.35m/s，对0.3μm颗粒截留效率99.99%

7. 恒温恒湿培养箱：温度范围室温至70℃，控温精度±0.5℃，湿度控制范围40-95%

8. 厌氧培养系统：舱内氧浓度低于0.1%，配钯催化剂与厌氧指示剂

9. 高速冷冻离心机：最高转速15000rpm，最大相对离心力20000g以上，温控4-40℃

10. 拍击式均质器：拍击速度每分钟60-480次，配无菌均质袋用于样品前处理