检测项目

1.总RNA含量测定：紫外分光光度法（A260/A280比值1.8-2.1），定量范围0.1-100μg/mL。

2.RNA完整性分析：电泳法（RIN值≥7.0）或微流控芯片法（28S/18SrRNA比值≥1.5）。

3.微生物污染检测：qPCR法定量细菌/真菌DNA残留（检出限≤10pg/mg）。

4.内毒素水平测定：显色基质法（限值≤0.25EU/mg）。

5.蛋白质残留分析：BCA法（限值≤0.1%w/w）。

检测范围

1.酵母提取物制品：包括自溶酵母粉、RNA粗提液及纯化制剂。

2.发酵液样本：啤酒、葡萄酒等酿造过程中酵母活性监测。

3.生物制药原料：疫苗生产用酵母表达系统质量控制。

4.食品添加剂：含酵母来源核苷酸的功能性食品原料。

5.科研用酵母菌株：基因工程改造菌株的RNA表达谱验证。

检测方法

ISO21571:2013《分子生物学分析方法通则》中核酸提取流程。

GB/T35810-2018《酵母核糖核酸测定方法》规范紫外分光光度法操作。

ASTME2149-2020《抗菌活性测试标准》中RNA稳定性评估条款。

GB4789.15-2016《食品安全国家标准真菌计数》关联RNA鉴定方法。

ISO22174:2005《分子生物学检测通则》qPCR扩增参数设置要求。

检测设备

1.ThermoNanoDrop2000紫外分光光度计：A260/A280比值测定及浓度计算。

2.Agilent2100生物分析仪：RNA完整性指数（RIN）自动化评分。

3.ThermoQubit4.0荧光计：低浓度RNA定量（检测下限0.1pg/μL）。

4.Bio-RadCFX96实时定量PCR仪：微生物污染DNA扩增检测。

5.ThermoMultiskanSkyHigh酶标仪：BCA法蛋白质残留吸光度读取。

6.Eppendorf5430R离心机：高速低温分离RNA沉淀物。

7.SartoriusQuintix分析天平：精确称量样品至0.01mg精度。

8.ThermoScientificHeracell150iCO2培养箱：活体酵母样品预处理培养。