检测项目

1.病毒核酸检测:实时荧光定量PCR(qPCR),灵敏度≤10copies/μL

2.病毒抗原检测:ELISA法(VP2蛋白),检测限≤5ng/mL

3.血清抗体检测:间接免疫荧光法(IFA),效价≥1:40可判阳性

4.病毒分离培养:A9细胞系培养观察CPE效应

5.电镜形态学鉴定:负染法观察直径18-24nm二十面体结构

检测范围

1.实验动物组织样本:肝/脾/肾组织匀浆液

2.细胞培养物:原代细胞/传代细胞系上清液

3.生物制品原料:胎牛血清/胰蛋白酶等原材料

4.实验器械洗脱液:笼具/饮水系统冲洗液

5.基因工程产品:重组病毒载体/单克隆抗体中间体

检测方法

ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》

GB/T34791-2017《实验动物微生物学等级及监测》

ASTMF2312-18《细胞培养产品中病毒污染测试标准指南》

GB19489-2008《实验室生物安全通用要求》

ISO/IEC17025:2017《检测和校准实验室能力通用要求》

检测设备

1.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪:TaqMan探针法核酸定量

2.ThermoMultiskanFC酶标仪:450nm波长ELISA吸光度测定

3.Eppendorf5430R高速冷冻离心机:20000g样本预处理

4.LeicaDMi8倒置荧光显微镜:40物镜观察细胞病变效应

5.MiltenyiBiotecgentleMACS组织匀浆器:程序化组织破碎

6.HitachiHT7800透射电镜:120kV加速电压观察病毒颗粒

7.SartoriusIncubatorCB170恒温培养箱:37℃0.5℃细胞培养

8.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:FITC标记抗体分析

9.MettlerToledoXSR205电子天平:0.01mg精度称量试剂

10.ThermoHeracellVIOS160iCO₂培养箱:5%CO₂浓度控制