检测项目

1.细胞形态学变化:采用倒置相差显微镜(400)观察核质比增大、极性消失等恶性表型

2.集落形成效率:软琼脂培养14天后统计>50μm的锚定非依赖性集落数量

3.DNA损伤响应:γ-H2AX焦点计数(流式细胞仪检测通道FL1/FL3)

4.代谢协同作用:6-硫代鸟嘌呤抗性试验(浓度梯度0.1-10μg/mL)

5.端粒酶活性:TRAP-PCR法测定端粒重复序列扩增量(阈值循环Ct值≤35)

检测范围

1.工业化学品:包括塑化剂(邻苯二甲酸酯类)、阻燃剂(多溴联苯醚)等

2.药品原料:化学合成中间体、辅料(聚山梨酯80)及生物制剂

3.化妆品成分:染发剂(对苯二胺)、防腐剂(尼泊金酯类)

4.医疗器械材料:可降解聚合物(PLGA)、金属植入物溶出物

5.环境污染物:多环芳烃(苯并[a]芘)、农药残留(草甘膦代谢物)

检测方法

1.OECDTG451:化学品体外恶性转化试验标准流程

2.ISO10993-3:2014:医疗器械遗传毒性评价补充方法

3.GB/T16886.3-2019:医疗器械生物学评价第3部分

4.ASTMF2148-13:纳米材料细胞转化试验指南

5.GBZ/T240.24-2011:化学毒物致癌性试验规范

检测设备

1.NikonEclipseTs2R-FL倒置显微镜:配备DS-Fi3摄像头及NIS-Elements成像系统

2.ThermoScientificHeracell150iCO2培养箱:温度波动0.1℃,CO2控制精度0.2%

3.BeckmanCoulterCytoFLEXS流式细胞仪:配置3激光13色检测通道

4.EppendorfMastercyclerX50PCR仪:支持梯度温控(温控精度0.1℃)

5.MolecularDevicesSpectraMaxiD5酶标仪:具备UV/Vis双光路检测系统

6.MiltenyiBiotecGentleMACSOcto解离仪:8通道程序化组织处理

7.SartoriusIncucyteS3活细胞分析系统:实时动态成像(分辨率≥14401080)

8.AgilentBioTekCytation5多功能读板机:整合荧光显微与微孔板检测功能