检测项目

1.脂蛋白脂肪酶(LPL)活性测定:活性单位(U/L)、底物浓度(0.5-2.0mmol/L甘油三酯)、反应温度(370.5℃)

2.激素敏感脂肪酶(HSL)定量分析:线性范围(0.1-50ng/mL)、pH值范围(6.8-7.4)、特异性抗体效价(≥1:10000)

3.乙酰辅酶A羧化酶(ACC)动力学参数:Km值测定(10-200μM乙酰辅酶A)、Vmax计算(nmol/min/mg蛋白)

4.脂肪酸合成酶(FAS)表达水平:WesternBlot定量(10-100μg总蛋白上样量)、灰度值分析误差≤5%

5.胆固醇酯转移蛋白(CETP)功能检测:转移效率(%)、孵育时间(160.5h)、质控品回收率(95-105%)

检测范围

1.临床样本:人/动物血清、血浆及组织匀浆液

2.生物制品:重组脂代谢酶制剂、基因治疗载体

3.食品原料:植物油料提取物、功能性脂质添加剂

4.药品制剂:降脂类药物原料药及制剂

5.化妆品成分:透皮吸收型脂质载体系统

6.工业产品:生物柴油催化剂残留物

检测方法

1.分光光度法:依据ISO15193:2009测定LPL活性

2.ELISA法:参照GB/T33411-2016进行HSL定量分析

3.放射性同位素标记法:按ASTME2694-16测定CETP转移效率

4.高效液相色谱法(HPLC):执行GB5009.257-2016检测脂肪酸组成

5.实时荧光定量PCR:基于YY/T1596-2017测定ACCmRNA表达量

6.质谱联用技术:采用ISO21338:2010进行代谢产物鉴定

检测设备

1.Hitachi7180全自动生化分析仪:多参数同步检测系统

2.ThermoScientificMultiskanSkyHigh微孔板读数仪:波长范围340-850nm

3.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备DAD检测器及ZORBAXSB-C18色谱柱

4.Bio-RadChemiDocMP成像系统:支持化学发光及荧光WesternBlot分析

5.BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机:最大转速100,000rpm

6.EppendorfMastercyclerX50PCR仪:温度均一性0.1℃

7.PerkinElmerClarus690GC-MS联用仪:EI源质量范围1-1200m/z

8.MalvernZetasizerNanoZSP粒径分析仪:动态光散射测量范围0.3nm-10μm

9.RocheCobasc501全自动免疫分析仪:支持电化学发光检测技术

10.ShimadzuUV-2600i分光光度计:带宽0.1/0.5/1/2/5nm可调