检测项目
1.酶活性测定:定量分析单位时间内底物转化量(U/mg)
2.比活力计算:单位蛋白质量对应的酶活性(U/mgProt)
3.Km值测定:米氏常数测定(mmol/L)
4.Vmax分析:最大反应速率(μmol/min)
5.热稳定性测试:40℃/60℃下残余活性(%)
6.pH耐受性:最适pH范围及稳定性区间(pH5.0-8.0)
7.金属离子影响:Ca⁺/Mg⁺/Zn⁺浓度梯度实验(0.1-10mM)
检测范围
1.微生物发酵液:大肠杆菌/枯草芽孢杆菌表达体系
2.动植物组织提取物:肝脏/胰腺/植物根系样本
3.重组蛋白制剂:His标签/GST标签纯化产物
4.临床诊断样本:血清/尿液/脑脊液标本
5.工业酶制剂:固定化酶颗粒/纳米载体复合酶
检测方法
1.分光光度法:ISO20633-2018《酶活性测定通用规范》
2.高效液相色谱法:GB/T37840-2019《生物制品中酶活性测定》
3.荧光分析法:ASTME2935-18《荧光标记酶动力学测试》
4.等温滴定量热法:ISO18756:2020《酶促反应热力学分析》
5.圆二色光谱法:GB/T34800-2017《蛋白质构象稳定性测试》
检测设备
1.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪(波长范围340-850nm)
2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统(配备DAD检测器)
3.MalvernZetasizerNanoZSP动态光散射仪(粒径分析)
4.TAInstrumentsQ2000差示扫描量热仪(温度精度0.1℃)
5.ShimadzuUV-2600i分光光度计(双光束光学系统)
6.PerkinElmerLS55荧光光谱仪(三维扫描功能)
7.BeckmanCoulterOptimaXPN-80超速离心机(最大转速80,000rpm)
8.Metrohm848TitrinoPlus自动电位滴定仪(pH/离子浓度测定)
9.BrukerTensorII傅里叶红外光谱仪(ATR附件)
10.GEHealthcareKTApure蛋白纯化系统(在线监测UV/pH/EC)