检测项目

1.酶活性测定:反应体系pH7.40.2,温度370.5℃,底物浓度梯度0.1-10mM
2.底物特异性验证:氯霉素/乙酰辅酶A摩尔比1:1至1:5梯度测试
3.抑制剂敏感性分析:红霉素浓度梯度0.01-1mg/mL抑制率测定
4.热稳定性测试:30-60℃温育30分钟后的残余活性测定
5.米氏常数(Km)计算:Lineweaver-Burk双倒数法测定

检测范围

1.重组表达蛋白:大肠杆菌/酵母表达系统制备的CAT酶制剂
2.生物样本:动物肝脏/肾脏组织匀浆液
3.食品基质:乳制品/蜂蜜中残留酶活性监测
4.医药中间体:抗生素生产过程中的酶催化产物
5.环境样本:污水处理厂生物膜中的耐药基因表达产物

检测方法

1.ISO20776-1:2020《体外药敏试验参考方法》第4.3章酶动力学分析
2.GB/T37870-2019《微生物抗菌剂酶活性测定通用要求》
3.ASTME2313-20《体外细胞毒性试验中酶活性测定标准指南》
4.GB4789.43-2016《食品微生物学检验抗生素耐受性测定》
5.ISO10993-5:2009《医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验》

检测设备

1.ThermoScientificMultiskanSkyHigh全波长酶标仪(波长范围340-850nm)
2.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪(配二极管阵列检测器)
3.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪(温控精度0.1℃)
4.BeckmanCoulterAU5800全自动生化分析仪(比色法检测模块)
5.MalvernZetasizerNanoZSP动态光散射仪(粒径测量范围0.3nm-10μm)
6.SartoriusCubisMSA225S-1CE微量天平(分辨率0.01mg)
7.MemmertINB500恒温培养箱(温度均匀性0.3℃)
8.Bio-RadMini-PROTEANTetra电泳系统(电压范围10-300V)
9.Metrohm905Titrando自动电位滴定仪(pH测量精度0.001)
10.ShimadzuUV-2600i分光光度计(带宽0.1-5nm可调)