检测项目
1.蛋白质等电点测定:pH梯度范围3-10(线性/非线性),分辨率0.01pH单位
2.分子量分布分析:分离范围10-250kDa,误差率≤5%
3.蛋白上样量优化:推荐载样量50-500μg(考马斯染色)或1-50μg(银染)
4.pH梯度稳定性测试:电压8000V条件下梯度偏移≤0.2pH/cm
5.染色灵敏度验证:考马斯亮蓝R-250检测限1ng/点,银染法0.1ng/点
检测范围
1.生物样本:血清/血浆蛋白组、组织提取液、细胞裂解液
2.重组蛋白药物:单克隆抗体、细胞因子类生物制剂
3.微生物产物:细菌分泌蛋白、真菌次生代谢产物
4.植物提取物:种子贮藏蛋白、叶片光合作用相关酶系
5.食品基质:乳制品酪蛋白组分、谷物过敏原蛋白鉴定
检测方法
ISO19688:2017《表面化学分析-微生物分析中的双向电泳法》
GB/T22278-2008《蛋白质分离纯化用双向电泳技术条件》
ASTME3066-16《二维凝胶电泳图像分析标准指南》
YY/T1538-2017《医用质谱仪校准用蛋白质标准物质制备规范》
ISO/TS21396:2017《胶原蛋白表征的双向电泳分析方法》
检测设备
1.Bio-RadProteani12IEFSystem:配备11cmIPG胶条槽,最大电压10000V
2.GEHealthcareEttanIPGphor3:支持12通道并行等电聚焦程序
3.HoeferSE600Ruby:垂直电泳系统带双板冷却装置
4.ShimadzuCS-9301PC:激光光密度扫描仪(633nm/532nm双波长)
5.AmershamImageMaster2DPlatinum:图像分析软件(支持30000点/胶分析)
6.ThermoScientificPierce2-DQuantKit:蛋白质定量专用试剂盒(灵敏度25ng/μL)
7.Agilent2100Bioanalyzer:芯片式电泳系统用于预分离质量评估
8.EppendorfCentrifuge5430R:冷冻离心机(最大RCF30,130g)
9.OlympusVS120-S6-W:全自动切片扫描显微镜(40倍物镜)
10.SartoriusSE2AnalyticalBalance:百万分之一天平(0.001mg精度)