检测项目

1.糖基化位点分析:采用LC-MS/MS测定N-连接(Asn-X-Ser/Thr)与O-连接(Ser/Thr)位点覆盖率
2.唾液酸含量测定:通过HPLC-FLD定量Neu5Ac/Neu5Gc含量(灵敏度0.1μg/mL)
3.单糖组成分析:HPAEC-PAD测定甘露糖/半乳糖/岩藻糖等8种单糖摩尔比
4.糖链释放效率:PNGaseF酶解后CE-LIF评估释放率(>95%)
5.糖型异质性:MALDI-TOFMS测定分子量分布(分辨率≥20,000)

检测范围

1.生物制药:单克隆抗体药物(如利妥昔单抗)、重组蛋白制剂
2.临床诊断试剂:肿瘤标志物检测用糖蛋白抗原(CA125/CA19-9)
3.细胞培养产物:CHO细胞表达的重组促红细胞生成素(EPO)
4.食品添加剂:乳铁蛋白、卵粘蛋白等功能性糖蛋白
5.科研样本:细胞膜表面CD44/P-selectin等跨膜糖蛋白

检测方法

1.ASTME3072-21:基于HILIC-UPLC的糖蛋白唾液酸定量标准方法
2.ISO21362:2020:质谱法测定N-连接糖链结构的国际规范
3.GB/T38163-2019:中国药典收录的糖蛋白等电聚焦电泳法
4.USP<1238>:美国药典规定的糖基化修饰表征指南
5.GB/T39990-2021:荧光标记法测定O-连接糖链的技术要求

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪:配备FLR检测器用于单糖定量
2.ThermoScientificOrbitrapExploris480质谱仪:高分辨率糖型分析(m/z200-4000)
3.WatersXevoG2-XSQTOF:配备UNIFI软件实现自动糖链注释
4.BeckmanPA800Plus毛细管电泳系统:激光诱导荧光检测模式(LIF)
5.BrukerUltrafleXtremeMALDI-TOF:反射模式质量精度<50ppm
6.ShimadzuNexeraX2UHPLC:二维色谱分离复杂糖型
7.GEHealthcareKTApure25:凝胶过滤色谱测定糖蛋白聚合体
8.PerkinElmerJANUSG3工作站:自动化样品前处理平台
9.Bio-RadProteOnXPR36:表面等离子共振技术测定糖蛋白亲和力
10.DionexICS-6000离子色谱系统:脉冲安培检测单糖组成