检测项目

1.序列长度验证：通过电泳迁移率测定18-25碱基对的寡核苷酸链长度偏差（1bp）

2.GC含量分析：采用紫外分光光度法测定引物中鸟嘌呤-胞嘧啶比例（20%-80%范围）

3.二级结构评估：使用mfold软件预测ΔG值（＞-3.5kcal/mol为合格）

4.热力学稳定性：测定Tm值（55-65℃区间）与ΔH焓变参数（10%）

5.污染物检测：HPLC法测定DMT基团残留（＜0.1OD260）及盐离子浓度（＜10mM）

检测范围

1.PCR扩增用DNA引物（包括qPCR探针/引物组合体系）

2.高通量测序建库接头与索引引物

3.CRISPR-Cas9基因编辑系统sgRNA合成产物

4.荧光标记修饰引物（FAM/HEX/Cy5等染料标记）

5.基因合成用长链寡核苷酸（60-120mer）

检测方法

1.ISO20395:2018《生物技术-合成寡核苷酸质量要求》第4.3节纯度测定法

2.GB/T30988-2014《分子生物学检测用合成寡核苷酸质量评价规范》

3.ASTME2653-14毛细管电泳法测定单链DNA片段分布

4.USP<467>残留溶剂测定气相色谱法

5.DIN58959-10:2014核酸浓度紫外分光光度法定量规程

检测设备

1.Agilent2100Bioanalyzer：基于微流控芯片的DNA片段分析系统（精度0.5bp）

2.ThermoScientificNanoDropOne：紫外/可见分光光度计（检测范围2-3700ng/μL）

3.WatersACQUITYUPLCH-Class：超高效液相色谱仪（色谱柱BEHC181.7μm）

4.AppliedBiosystemsSeqStudio：毛细管电泳遗传分析仪（36cm阵列长度）

5.BrukermaXisIIESI-QTOF：高分辨质谱仪（质量精度＜1ppm）

6.EppendorfMastercyclerX50：梯度PCR仪（温控精度0.1℃）

7.MalvernZetasizerNanoZSP：动态光散射仪（粒径检测范围0.3nm-10μm）

8.ShimadzuGC-2030：气相色谱仪（FID检测器灵敏度≤1pg/s）