可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 作物根系样品 | 菌剂田间应用评价、品种资源对比、接种效果验证 | 侵染率F%、侵染强度M%、丛枝丰度a% | KOH透明曲利本蓝染色、放大交叉法,Phillips & Hayman(1970)、McGonigle等(1990) |
| 果树及木本植物须根 | 果园土壤改良、苗木侵染动态观察、菌根化育苗 | 侵染率、泡囊密度、侵染强度 | 墨醋法或酸性品红染色结合方格交叉法,Vierheilig等(1998) |
| 菌根菌剂与生物肥料产品 | 微生物菌剂功效验证、菌根菌剂质量评价 | 孢子密度、活孢子率、盆栽诱集侵染力 | 湿筛倾析法结合蔗糖离心浮选、镜检计数,Gerdemann & Nicolson(1963) |
| 根际土壤与栽培基质 | 土壤微生物生态调查、连作障碍评价、复垦修复监测 | 孢子密度、土生菌丝长度、易提取球囊霉素EE-GRSP | 湿筛倾析、滤膜荧光染色,Jakobsen等(1992) |
| 药用与园艺植物根系 | 栽培药材引种驯化、抗逆机理研究 | 侵染率、丛枝丰度、季节侵染动态 | 曲利本蓝染色结合Trouvelot评分法(1986) |
| 模式植物研究材料 | 蒺藜苜蓿、烟草等共生机理与群体遗传研究 | 侵染动态、丛枝发育分级 | 曲利本蓝或酸性品红染色、树脂半薄切片显微观察 |
检测项目
1. 菌根侵染率(F%):统计范围0-100%,建议每样测量不少于100条长约1cm的根段
2. 总侵染强度(M%)与侵染根段强度(m%):0-100%,按Trouvelot 0-5级评分换算
3. 丛枝丰度(a%):0-100%,表征共生功能结构的养分交换活性
4. 菌丝、泡囊与丛枝侵染率:三类结构分别计数,范围0-100%
5. AM真菌孢子密度:每10g干土1-500个,湿筛倾析结合蔗糖离心浮选计数
检测范围
1. 作物根系:玉米、小麦、大豆、水稻、苜蓿等作物根样
2. 果树与木本植物须根:柑橘、葡萄、苹果、枣树、茶树等细根样品
3. 菌根菌剂与生物肥料产品:菌剂、种衣剂、基质添加物等功效验证样品
4. 药用植物根系:甘草、黄芪、丹参、铁皮石斛等栽培药材根样
5. 根际土壤与栽培基质:大田根际土、温室基质、矿山复垦修复基质
检测方法
1. Phillips & Hayman(1970)改良曲利本蓝染色法:KOH透明、盐酸酸化、曲利本蓝染色,侵染率测定的经典流程
2. McGonigle等(1990)放大交叉法:区分丛枝、泡囊与菌丝的差示计数,分别获得三类结构侵染率
3. Trouvelot等(1986)菌根评分法:结合MYCOCALC换算F%、M%、m%、a%四项指标
4. Vierheilig等(1998)墨醋染色法:蓝黑墨水加醋酸染色,富含酚类田间根系的低毒替代方案
5. Gerdemann & Nicolson(1963)湿筛倾析法:根际土壤AM真菌孢子提取与计数
检测设备
1. 生物显微镜(Olympus BX53):总放大倍数40×-1000×,平场半复消色差物镜,200×-400×观察侵染结构
2. 体视显微镜(Leica M80):变焦范围7.5×-60×,用于根段封片扫描与孢子挑取
3. 精密恒温水浴(LAUDA E100):温度范围室温-100℃,控温稳定性±0.1℃,用于KOH透明与恒温染色
4. 电热鼓风干燥箱(一恒DHG-9070A):温度范围RT+10-250℃,波动度±1℃,用于样品干燥与试剂预热
5. 高速冷冻离心机(Thermo Sorvall ST 16R):最高转速15000rpm,配50mL离心筒转子,用于孢子浮选除杂
6. 全温培养摇床(HZQ-F160):转速40-300rpm,用于土样恒温振荡洗脱
7. 分析天平(Mettler Toledo ME204):称量范围220g,可读性0.1mg,用于土壤样品称量
8. 酸度计(Mettler Toledo FE28):测量范围-2.00-16.00pH,精度±0.01pH,用于染色试剂配制
9. 标准检验筛套筛(0.5mm/150μm/45μm/38μm):不锈钢编织网,用于湿筛倾析孢子提取
10. 显微数码成像系统(Image-Pro Plus 6.0配500万像素摄像头):交叉点计数、图像存档与数据溯源