可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法/参考 |
|---|---|---|---|
| 新鲜榴莲果肉、果皮与果柄组织 | 市售果实品种真伪核验、名贵品种高价标注验证、收购定价抽检 | 品种DNA指纹比对、SSR分型、SNP基因分型、内转录间隔区二区与psbA-trnH条形码测序 | 改良CTAB法提取基因组DNA，参照GB/T 38551-2020植物品种鉴定MNP标记法建库比对 |
| 榴莲叶片、叶柄与嫩梢 | 种质资源圃管理、苗期提前鉴定、引种材料真实性确认 | SSR核心引物组扩增、毛细管电泳片段分析、遗传相似度聚类 | 荧光标记SSR毛细管电泳，配合叶形、刺形、果形等形态学性状双重核验 |
| 冷冻果肉、果泥与冻干果块 | 进口冻果通关核验、加工原料溯源、贴牌产品抽查 | 降解DNA小片段扩增、SNP靶点分型、近红外光谱品种判别 | 高保真短片段扩增（150-300bp），近红外PLS-DA判别模型辅助筛查 |
| 榴莲种苗、接穗与砧木 | 种植园购苗把关、嫁接繁殖材料确认、品种权保护前期筛查 | 品种真实性鉴定、种质一致性核验 | 分子标记为主、DUS测试性状为辅，参照GB/T 19557.1总则思路执行 |
| 榴莲基因组DNA提取物 | 科研送样复核、建库前质控、合作实验室交叉验证 | DNA浓度、纯度（A260/A280、A260/A230）、完整性分级 | 超微量分光光度计与凝胶电泳联合质控 |
检测项目
1. SSR分子标记分型：核心引物8-24对，每位点等位基因3-12个，多态信息含量PIC≥0.5
2. SNP基因分型：目标位点100-1000个，分型成功率≥95%，最低DNA投入量0.1-1纳克
3. DNA条形码测序：内转录间隔区二区、rbcL、matK、psbA-trnH片段长度150-800bp，种级比对相似度≥99%
4. 基因组DNA质量：A260/A280比值1.8-2.0，A260/A230比值2.0-2.2，浓度不低于10纳克每微升
5. 果实形态学指标：单果重1.5-6千克，果肉率25-40%，果刺密度、苞片形态与种子数分级记录
6. 近红外光谱判别：采集范围1000-2500纳米，品种判别模型准确率≥95%
检测范围
1. 马来西亚注册品种：猫山王（D197）、苏丹王（D24）、黑刺（D200）、红虾（D175）、竹脚（D160）
2. 泰国主栽品种：金枕头（Monthong）、青尼（Chanee）、金纽（Kradum）
3. 越南与菲律宾品种：RI6、Dona及地方品系的真伪与近缘关系判定
4. 榴莲属近缘种：普通榴莲与红肉榴莲等近缘种的区分及批次混杂排查
5. 加工制品原料：冷冻去核果肉、果泥、馅料、冻干块中榴莲成分及品种归属溯源
检测方法
1. GB/T 38551-2020 植物品种鉴定 MNP标记法
2. GB/T 19557.1-2004 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 总则
3. 改良CTAB联合PVP与β-巯基乙醇提取法：针对高多糖高多酚果肉组织的高质量基因组DNA制备
4. 荧光标记SSR毛细管电泳法：参照农业行业分子标记技术规范进行等位基因判读
5. 植物DNA条形码法：以rbcL与matK为核心条形码，辅以psbA-trnH与内转录间隔区二区提高品种分辨率
6. 近红外光谱化学计量学判别法：PLS-DA与主成分分析联合建模
检测设备
1. 梯度PCR扩增仪：温控范围4-99℃，升降温速率≥5℃/秒，96孔模块
2. 毛细管电泳遗传分析仪：8道毛细管，片段判读精度±0.5bp
3. 超微量分光光度计：检测波长220-750纳米，最小取样量0.5-2微升
4. 实时荧光定量PCR仪：检测通道4色以上，温度均一性±0.25℃
5. 高通量测序平台：双端150bp读长，单次运行可输出数千万条有效序列
6. 高速冷冻离心机：最高转速15000转每分以上，温控4℃
7. 凝胶成像分析系统：蓝光与紫外双光源，像素500万以上
8. 傅里叶变换近红外光谱仪：扫描波数10000-4000，光谱分辨率8波数
9. 超低温保存箱：控温-86℃，用于组织与DNA长期保存
10. 恒温金属浴：控温范围室温至100℃，控温精度±0.1℃