检测项目

1.幼虫形态特征鉴定:头壳宽度0.8-1.2mm,腹足趾钩单序环形排列

2.DNA条形码分析:COI基因序列比对(GenBank数据库相似度≥98%)

3.抗药性基因检测:GABA受体基因突变位点(A301S/T)筛查

4.卵块生物测定:孵化率统计(温度251℃,湿度75%条件下)

5.肠道微生物分析:16SrRNA测序(V3-V4区扩增引物341F/806R)

检测范围

1.玉米田土壤样本(耕作层0-20cm)

2.水稻植株残体(茎秆基部10cm段)

3.仓储小麦籽粒(含水量≤14%)

4.诱捕器粘虫板(性信息素诱芯残留物)

5.转基因抗虫作物叶片(Bt蛋白表达量≥5μg/g)

检测方法

ISO21702:2019昆虫抗药性测定标准(点滴法)

GB/T36850-2018植物检疫害虫分子检测规程

ASTME2813-18昆虫DNA提取与纯化标准

NY/T3088-2017草地贪夜蛾田间监测技术规范

SN/T5439-2022进出境粮谷中鳞翅目幼虫检疫鉴定

检测设备

1.LeicaM205C体视显微镜(20.5:1变倍比,LED冷光源)

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(96孔模块)

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)

4.IlluminaNovaSeq6000测序系统(双流动槽配置)

5.Agilent4200TapeStation生物分析仪(DNA灵敏度0.1ng/μL)

6.OlympusBX53荧光显微镜(UIS2光学系统)

7.SartoriusCP225D电子天平(0.01mg分辨率)

8.MemmertIPP110培养箱(温度波动0.1℃)

9.BioTekSynergyH1酶标仪(四光栅单色器)

10.HamiltonMICROLABSTARlet液体工作站(4通道移液臂)