检测项目
1.形态学鉴定:体长1.8-2.5mm;鞘翅纵沟间距≤0.03mm;后足胫节端刺长度≥0.15mm
2.分子生物学检测:COI基因序列比对(658bp);ITS2区域扩增特异性引物设计
3.寄主植物残留分析:十字花科植物DNA检出限≤0.1ng/μL
4.抗药性监测:乙酰胆碱酯酶活性抑制率≥70%判定为抗性种群
5.种群动态监测:卵期发育积温模型(有效积温≥85日度)
检测范围
1.十字花科农作物种子(甘蓝、油菜、白菜等)
2.新鲜植株样本(叶片虫瘿直径≥0.5mm)
3.仓储期农产品(含水率≤12%的干燥样本)
4.入境植物检疫材料(木质包装物及运输工具残留物)
5.土壤样本(耕作层0-20cm深度虫卵筛查)
检测方法
ISO21571:2013分子生物学检测规范(核酸提取与扩增)
GB/T18085-2021植物检疫害虫实验室鉴定规程
SN/T2966-2011进出口粮谷中跳甲科害虫检疫鉴定方法
ASTME1752-17昆虫抗药性生物测定标准指南
NY/T3088-2017农作物害虫监测技术规范
检测设备
LeicaM205C体视显微镜(20.5:1变倍比,DFC450相机系统)
ABI7500实时荧光定量PCR仪(TaqMan探针法检测)
ThermoScientificSorvallST16离心机(最大转速15,000rpm)
Agilent4200TapeStation系统(DNA/RNA完整性分析)
EppendorfCP7超低温冷冻切片机(-35℃样本处理)
SanyoMLR-351H人工气候箱(温控精度0.5℃)
BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪(荧光标记计数)
PerkinElmerLambda365紫外分光光度计(核酸纯度OD260/280测定)
OlympusBX53显微成像系统(DP27相机,cellSens软件分析)
SartoriusQuintix224-1CN电子天平(0.1mg精度称量)