检测项目

1.病毒核酸定量检测:采用实时荧光定量PCR法(qPCR),灵敏度≤10copies/μL

2.外壳蛋白抗原检测:双抗体夹心ELISA法,检出限0.1ng/mL

3.全基因组测序分析:IlluminaNovaSeq平台测序深度≥50

4.侵染活性测定:本氏烟接种试验,病灶面积测量精度0.5mm

5.血清学交叉反应测试:WesternBlot法验证抗体特异性

检测范围

1.茄科植物叶片样本(番茄/辣椒/烟草)

2.葫芦科作物种子(西瓜/黄瓜/南瓜)

3.土壤及栽培基质中病毒残留物

4.昆虫介体(烟粉虱/蚜虫)带毒率检测

5.组培苗病毒脱除效果验证

检测方法

ISO16140-3:2022《分子生物学方法验证规范》

GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程》

ASTME3066-2016《植物病毒ELISA检测指南》

GB/T28068-2011《番茄斑萎病毒检疫鉴定方法》

OEPPPM7/113(1)《国际植物保护公约》病毒分离标准

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5:实时荧光定量PCR仪,支持TaqMan探针法

2.BioTekSynergyH1:多功能酶标仪,含荧光/化学发光模块

3.IlluminaNovaSeq6000:高通量测序系统,通量20Breads/run

4.LeicaDM3000LED:正置荧光显微镜,配备DFC7000T相机

5.EppendorfCentrifuge5430R:高速冷冻离心机,最大rcf30,130g

6.Agilent4200TapeStation:核酸质量分析系统,灵敏度0.1ng/μL

7.BeckmanCoulterCytoFLEXS:流式细胞仪,检测粒径范围0.2-40μm

8.MemmertIPP110:智能型恒温培养箱,温度均匀性0.3℃

9.MiltenyiBiotecGentleMACS:组织破碎仪,程序化裂解参数设置

10.SartoriusCP225D:精密分析天平,称量精度0.01mg