大豆蚜检测

检测项目

1.形态学特征鉴定：体长0.9-2.1mm，触角6节末端黑色，腹管圆筒状长0.13-0.22mm

2.线粒体COI基因序列分析：扩增710bp特异性片段（引物：LCO1490/HCO2198）

3.种群密度分级：按单株虫量分为Ⅰ级（≤10头）、Ⅱ级（11-50头）、Ⅲ级（＞50头）

4.抗药性基因检测：检测kdr突变（L1014F）频率≥5%判定为抗性种群

5.病毒携带筛查：SMV（大豆花叶病毒）检出限10^3copies/μL

检测范围

1.田间大豆植株叶片背面虫体样本

2.仓储大豆茎秆残留物中的越冬卵

3.土壤表层0-5cm的迁飞个体监测

4.进口大豆种子携带的检疫性虫卵

5.农业器械表面附着虫体残留物

检测方法

GB/T31735-2015《大豆蚜检疫鉴定技术规范》形态学鉴定流程

ISO21571:2005分子生物学检测中DNA提取与纯化要求

ASTME1752-17《昆虫抗药性生物测定标准指南》毒力测定法

GB23200.121-2021植物源性食品中昆虫残留量测定

SN/T2033-2007进出境豆类检疫规程虫害筛查程序

检测设备

OlympusSZX16体视显微镜：40-160倍连续变倍观察形态特征

ThermoFisherGeneAmp9700PCR仪：温度精度0.3℃的核酸扩增系统

Agilent4200TapeStation生物分析仪：DNA完整性指数（DIN）≥7.0判定合格

LeicaCM1950冷冻切片机：制作10μm厚度的虫体横截面标本

BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪：检测SMV病毒粒子浓度

SartoriusCP225D电子天平：称量精度0.01mg的虫体称重

EscoAC2-4S1生物安全柜：符合NSF49ClassIIA2型防护标准

MemmertIPP110培养箱：温度波动度0.5℃的恒温饲养系统