地诺单抗检测

检测项目

1.药物浓度测定：采用HPLC法测定有效成分含量，线性范围0.1-10mg/mL，RSD≤2.0%

2.纯度分析：SEC-HPLC检测高分子量聚集体（HMW≤3.0%），CE-SDS测定轻/重链比例（目标值≥95%）

3.生物活性测定：基于RANKL抑制效能的细胞活性实验（IC50值≤1.5nM）

4.电荷异质性：成像毛细管电泳（iCIEF）测定等电点（pI6.8-7.2），主峰比例≥80%

5.糖基化分析：HILIC-UPLC定量N-糖型（G0F/G1F/G2F占比≥85%）

检测范围

1.地诺单抗原料药：包括原液中间体及终产品的理化特性表征

2.预充式注射液成品：无菌性、可见异物及亚可见颗粒物检验

3.生物类似药可比性研究：与原研药的结构相似性评估

4.辅料相容性研究样品：组氨酸缓冲液与聚山梨酯80的相互作用分析

5.稳定性试验样品：加速/长期条件下降解产物的监测

检测方法

1.HPLC法：USP<621>/ChP2020通则0512测定药物浓度及纯度

2.细胞活性实验：参照USP<1032>建立RANKL-NF-κB报告基因系统

3.SEC-MALS：ASTMF2881-18标准进行绝对分子量测定

4.亚微米颗粒检测：ISO21501-4光阻法计数≥10μm粒子（≤6000粒/容器）

5.残留宿主蛋白：GB/T38165-2019ELISA法限值≤100ppm

检测设备

1.WatersAlliancee2695HPLC系统：配备PDA检测器，用于药物浓度及纯度分析

2.Agilent1260InfinityIISEC色谱仪：搭配多角度光散射检测器（MALS），分子量测定精度1%

3.BeckmanPA800Plus毛细管电泳仪：iCIEF模式分辨率达0.01pI单位

4.MalvernPanalyticalZetasizerPro：动态光散射技术测量粒径分布（PDI≤0.15）

5.PerkinElmerEnVision多模式读板机：执行细胞活性实验的荧光信号采集

6.ShimadzuLCMS-8060三重四极杆质谱仪：肽图分析序列覆盖度≥95%

7.ParticleSizingSystemsAccuSizer780APS：光阻法颗粒计数灵敏度达0.5μm

8.ThermoScientificDionexICS-6000离子色谱仪：残留TritonX-100检测限0.01ppm

9.GEHealthcareBiacoreT200：表面等离子共振（SPR）测定抗原结合动力学（KD≤1nM）

10.SartoriusCedexBioHT分析仪：细胞培养上清的代谢物实时监测