检测项目
1. 病原菌分离培养:采用KB培养基(pH 7.2±0.2),培养温度28±1℃,观察48-72小时菌落形态
2. 组织病理学分析:石蜡切片厚度4-6μm,HE染色后显微镜观察(400×-1000×)
3. PCR扩增检测:靶向iaaL基因(引物序列F:5'-CGAACCTGGTGGAGTCG-3',R:5'-GTCGCCGTACTGCTCG-3')
4. 脂肪酸甲酯分析:使用MIDI Sherlock系统(TSBA6数据库),匹配相似度≥0.8
5. 抗药性基因筛查:blaTEM、qnrS等耐药基因探针杂交(杂交温度42±0.5℃)
检测范围
1. 油橄榄活体植株(叶片/枝条/根茎部病瘤组织)
2. 进出口苗木嫁接材料(芽接部位直径≥0.5cm)
3. 加工用果实样本(取样量≥200g/批次)
4. 栽培基质及灌溉水样(过滤孔径0.45μm)
5. 农用器械表面拭子(采样面积10×10cm²)
检测方法
1. ISO 16140-3:2021《食品链微生物学-方法验证》
2. GB/T 28046-2011《植物检疫处理准则》
3. ASTM E3066-16《植物病原菌实时荧光PCR标准》
4. GB/T 36850-2018《林木病害分子检测规程》
5. EPPO PM 7/42 (2)《假单胞菌属鉴定标准》
检测设备
1. Thermo Fisher QuantStudio 5实时荧光PCR仪(96孔模块)
2. Leica DM750生物显微镜(1000×油镜)
3. Memmert IPP110培养箱(温度波动±0.3℃)
4. Agilent 7890B气相色谱仪(FID检测器)
5. Bio-Rad ChemiDoc MP成像系统(16bit CCD)
6. Sartorius CP225D电子天平(0.01mg精度)
7. Eppendorf Centrifuge 5430R(最大转速30,000rpm)
8. Milipore Milli-Q纯水系统(电阻率18.2MΩ·cm)
9. ESCO AC2-4S1生物安全柜(EN12469认证)
10. HiMedia M1297菌落计数器(0.1mm网格精度)