检测项目

1.形态学特征检测:孢子尺寸(4-62-3μm)、子囊果直径(120-200μm)、隔膜数量(3-5个)
2.分子生物学鉴定:ITSrDNA序列分析(V4-V9区域)、β-tubulin基因扩增
3.代谢产物检测:Sporormiamide类化合物含量(HPLC法测定≥0.1μg/g)
4.孢子浓度测定:单位质量样本孢子数(CFU/g)分级标准(Ⅰ级<10^3,Ⅱ级10^3-10^4,Ⅲ级>10^4)
5.生物活性测试:纤维素酶活性(CMCase≥15U/mg)、漆酶活性(ABTS法≥8U/mg)

检测范围

1.食品原料及加工品:谷物制品(小麦/玉米)、发酵乳制品
2.动物源性产品:反刍动物粪便样本、畜牧场垫料
3.环境基质:腐殖质土壤(深度0-20cm)、堆肥产物
4.中药材原料:含纤维素类药材(茯苓/猪苓)
5.工业材料:纸质包装物、木质容器内壁残留物

检测方法

1.ISO21527-2:2008《酵母和霉菌计数-膜过滤法》
2.GB4789.15-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》
3.ASTMD7788-14《环境样品中真菌孢子浓度测定标准指南》
4.GB/T36054-2018《真菌DNA条形码鉴定技术规范》
5.ISO16198:2015《植物基质中纤维素酶活性测定》

检测设备

1.OlympusBX53生物显微镜(1000油镜观察孢子形态)
2.ThermoScientificNanoDrop2000分光光度计(DNA纯度A260/A280≥1.8)
3.Agilent1260InfinityIIHPLC系统(C18色谱柱分离代谢产物)
4.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪(SYBRGreen法扩增β-tubulin基因)
5.MemmertIN75培养箱(251℃恒温培养7d)
6.SartoriusMD8空气采样器(50L/min流速采集气载孢子)
7.MettlerToledoXSR205电子天平(0.01mg精度称量样本)
8.Eppendorf5430R高速冷冻离心机(12000rpm分离菌丝体)
9.Millex-GP针式过滤器(0.22μm孔径除菌处理)
10.ThermoScientificHeratherm烘箱(105℃烘干样本至恒重)