检测项目
1.病原菌分离培养:采用PDA选择性培养基进行菌落形态观察(温度251℃,湿度85%)
2.孢子悬浮液浓度测定:使用血球计数板进行活孢计数(精度5%)
3.致病性基因检测:靶向Phytophthorapalmivora特异性基因序列(扩增区域ITS1/ITS4)
4.抗药性分析:测定甲霜灵/嘧菌酯EC50值(浓度梯度0.01-100μg/mL)
5.环境适应性评估:测试温度耐受范围(15-35℃)及pH适应区间(4.0-8.0)
检测范围
1.桄榔植株叶片样本(含典型病斑组织)
2.茎干维管束浸出液(取样深度≥5mm)
3.栽培基质土壤样本(粒径≤2mm)
4.种子表面附着物(灭菌水震荡洗脱法)
5.灌溉水样(滤膜截留法收集微生物)
检测方法
1.ISO16140-3:2021食品链微生物学-方法验证(病原菌分离)
2.GB/T36852-2018植物病原卵菌检测规程(孢子活性测定)
3.ASTMD8083-16实时荧光定量PCR法(基因定量分析)
4.ISO20776-1:2019抗菌剂敏感性试验(微量肉汤稀释法)
5.GB/T3543.4-1995农作物种子检验规程(种子带菌率测定)
检测设备
1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(基因扩增与定量分析)
2.OlympusBX53荧光显微镜(孢子形态观察与计数)
3.MemmertIPP110培养箱(温度/湿度梯度控制精度0.5℃)
4.SartoriusCP225D电子天平(称量精度0.01mg)
5.Eppendorf5430高速离心机(最大转速15,000rpm)
6.MilliporeMilli-Q超纯水系统(电阻率18.2MΩcm)
7.BioTekSynergyH1酶标仪(吸光度测量范围0-4OD)
8.ESCOAC2-4S1生物安全柜(HEPA过滤效率99.99%)
9.OhausST3100CpH计(测量精度0.01pH)
10.LabconcoFreeZone冻干机(冷阱温度-84℃)