银杏紫纹羽病检测

检测项目

1.菌丝体密度测定：采用显微计数法测量0.1g病组织样本中菌丝体数量（≥500CFU/g为阳性）
2.孢子悬浮液浓度检测：分光光度法测定OD600值（0.8-1.2为有效接种浓度）
3.土壤pH值监测：电位法测定耕作层（0-30cm）pH值（5.0-6.5为病害高发区间）
4.根系木质素含量分析：比色法测定健康根与病根木质素差异（病根下降40%-60%）
5.病原菌rDNA-ITS序列比对：PCR扩增后测序（与HQ283541.1相似度≥99%判定阳性）

检测范围

1.银杏属苗木及成年植株（包括扦插苗/实生苗/嫁接苗）
2.栽培基质及周边土壤（含腐殖土/泥炭土/砂壤土等）
3.有机肥料及堆肥产物（畜禽粪便/植物秸秆发酵物）
4.灌溉水源及排水系统沉积物
5.农林工具表面附着物（修枝剪/锄具/运输车辆）

检测方法

1.GB/T35337-2017《林业植物病害诊断技术规程》病原菌分离培养法
2.ISO11464:2006《土壤质量-物理化学分析预处理》土壤样本处理标准
3.ASTMD2974-20《泥炭材料测试方法》有机质含量测定规范
4.GB23200.18-2016《食品安全国家标准》分子生物学检测通则
5.ISO/IEC17025:2017《检测实验室通用要求》质量控制体系

检测设备

1.奥林巴斯CX43生物显微镜（1000油镜观察菌丝形态）
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（ITS基因扩增）
3.METTLERTOLEDOSevenExcellencepH计（土壤pH精确测量）
4.Eppendorf5430R高速冷冻离心机（病原菌孢子富集）
5.MemmertIPP110培养箱（28℃恒温真菌培养）
6.PerkinElmerLambda365紫外分光光度计（孢子浓度测定）
7.SartoriusQuintix224-1CN分析天平（0.1mg精度称量）
8.BIO-RADGelDocXR+凝胶成像系统（电泳产物分析）
9.LabconcoPurifierLogic+生物安全柜（Ⅱ级A2型病原操作）
10.HANONDHP-9052电热恒温培养箱（PDA培养基制备）