荚膜多糖检测

检测项目

1.荚膜多糖含量测定：采用苯酚-硫酸法或酶标仪定量分析（波长490nm）

2.分子量分布分析：通过高效凝胶渗透色谱法（HPSEC-MALLS）测定重均分子量（Mw）和多分散指数（PDI）

3.糖组成鉴定：使用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）分析单糖摩尔比（如葡萄糖、甘露糖、鼠李糖）

4.蛋白质残留检测：BCA法测定蛋白质含量（灵敏度≤0.5μg/mL）

5.核酸残留检测：紫外分光光度法（A260/A280比值≤1.8）

检测范围

1.肺炎链球菌/脑膜炎奈瑟菌疫苗原液及成品

2.细菌发酵液提取的粗制荚膜多糖

3.多糖-蛋白质结合疫苗中间体

4.医用生物材料表面修饰用多糖制剂

5.体外诊断试剂盒中的标准品校准品

检测方法

1.WHO技术报告系列No.977（疫苗用多糖质量控制）

2.ISO21527-2:2008微生物多糖纯度测定规范

3.GB/T35810-2018《多糖类生物制品质量检验规程》

4.ASTME2694-21热原试验中LAL法应用指南

5.EP10.0第2.6.14章（欧洲药典多糖分子量测定）

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪：配备示差折光检测器（RID）和光散射检测器（MALLS），用于分子量分析

2.ThermoScientificDionexICS-6000离子色谱系统：配置脉冲安培检测器（PAD），实现单糖组分定量

3.WatersACQUITYUPLCH-Class超高效液相色谱：搭配BEHSEC色谱柱（200,1.7μm），完成高分辨率分离

4.MalvernPanalyticalZetasizerNanoZSP：动态光散射技术测定多糖粒径分布（范围0.3nm-10μm）

5.PerkinElmerLambda35紫外可见分光光度计：双光束系统支持190-1100nm全波长扫描

6.ShimadzuGCMS-QP2020NX气相色谱质谱联用仪：DB-5MS毛细管柱（30m0.25mm0.25μm）用于糖衍生化分析

7.BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机：最大转速100,000rpm，用于多糖沉降系数测定

8.EppendorfBioSpectrometerfluorescence荧光分光光度计：激发波长280nm/发射波长350nm检测蛋白质污染

9.Metrohm859Titrotherm全自动滴定仪：电位滴定法测定硫酸基/磷酸基含量（精度0.1μL）

10.ThermoFisherSorvallST16R台式离心机：配备角转子（最大RCF21,130g），用于样品前处理分离