可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型典型应用场景主要检测项目常用方法 / 参考
Ⅱ型胶原蛋白原料粉鸡胸软骨、牛鼻软骨及鲨鱼软骨提取的未变性Ⅱ型胶原蛋白原料入厂验收与放行纯度、Ⅱ型胶原鉴别、羟脯氨酸含量、蛋白质含量、水分、灰分GB/T 45992-2025《胶原蛋白及其水解物》；SDS-PAGE电泳（参照GB/T 38482-2021）；GB/T 9695.23-2008羟脯氨酸分光光度法
关节健康类复配粉氨基葡萄糖、硫酸软骨素与Ⅱ型胶原蛋白复配的固体饮料及压片糖果配比核查Ⅱ型胶原蛋白含量、特征肽段确证、Ⅰ型源掺假鉴别、氨基酸组成液相色谱-串联质谱特征肽段定量；GB 5009.124-2016氨基酸分析仪法
胶原蛋白肽产品海洋鱼低聚肽粉、胶原肽固体饮料等胶原类型来源与水解程度鉴别分子量分布、肽含量、羟脯氨酸换算胶原量、灰分GB/T 22729-2008《海洋鱼低聚肽粉》；GB 31645-2018《胶原蛋白肽》
动物软骨组织鸡胸软骨、牛气管软骨、鲨鱼软骨等组织中Ⅱ型胶原含量与类型比例分析Ⅱ型胶原含量、胶原类型比例、氨基酸组成、含水率GB/T 9695.23-2008羟脯氨酸法换算；胃蛋白酶限制性酶解分离
软骨组织工程支架Ⅱ型胶原水凝胶、多孔支架等生物医用材料的原料表征与批次检验胶原类型确证、三螺旋结构完整性、纯度、孔径分布傅里叶红外光谱；圆二色谱；GB/T 38482-2021电泳法
保健食品成品胶囊、片剂、粉剂中Ⅱ型胶原蛋白功效成分定量与标签符合性核查功效成分含量、特征肽段确证、蛋白质总量、干燥失重GB/T 45992-2025；GB 5009.124-2016；液相色谱-串联质谱确证
研究用胶原质控样品细胞培养与组织工程研究用Ⅱ型胶原的批次质量控制纯度、凝胶形成能力、纤维自组装性能、等电点圆二色谱；浊度法自组装动力学；等电聚焦电泳

检测项目

1. Ⅱ型胶原蛋白纯度：SDS-PAGE还原电泳α1链密度扫描，原料级典型纯度≥90%（面积归一化）

2. 羟脯氨酸含量：氯胺T氧化分光光度法560nm显色测定，Ⅱ型胶原中约占氨基酸总量的9%-12%

3. 胶原蛋白含量换算：羟脯氨酸法测定后按换算系数7.1-7.7计算，随物种来源而异

4. 蛋白质含量：凯氏定氮法测定，以干基计典型≥90g/100g（参照肽类产品指标口径）

5. 分子量分布：Ⅱ型胶原α1链约95kDa、β链约190kDa、γ链约290kDa，水解物测1000Da以下占比

6. 三螺旋结构完整性：红外光谱1235与1450波数处吸收峰面积比接近1.0为保持良好，圆二色谱221nm正峰辅证

检测范围

1. Ⅱ型胶原蛋白原料：鸡胸软骨来源未变性Ⅱ型胶原、软骨提取物粉末等

2. 关节健康类食品原料：氨基葡萄糖软骨素复配粉、固体饮料、压片糖果等

3. 胶原蛋白肽产品：海洋鱼低聚肽粉、鱼皮与牛皮源胶原肽等

4. 动物软骨组织：鸡胸软骨、牛鼻软骨、牛气管软骨、鲨鱼软骨等

5. 生物医用胶原材料：软骨组织工程支架、Ⅱ型胶原水凝胶等

检测方法

1. GB/T 45992-2025 胶原蛋白及其水解物 通用检测方法

2. GB/T 38482-2021 动物源性I型胶原蛋白成分测定 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（Ⅱ型胶原电泳鉴别参照）

3. GB/T 9695.23-2008 肉与肉制品 羟脯氨酸含量测定 氯胺T分光光度法

4. GB 31645-2018 食品安全国家标准 胶原蛋白肽 理化指标检验

5. GB 5009.124-2016 食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定 氨基酸分析仪法

6. GB/T 22729-2008 海洋鱼低聚肽粉 分子量分布与肽含量测定

7. 液相色谱-串联质谱特征肽段法 Ⅱ型与Ⅰ型胶原鉴别及定量确证

检测设备

1. 氨基酸分析仪：茚三酮柱后衍生离子交换色谱，分离测定17种蛋白水解氨基酸，检出限约1nmol

2. 高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器，波长范围190-800nm，用于羟脯氨酸衍生物定量

3. 液相色谱-串联质谱联用仪：三重四极杆质量分析器，质量数范围m/z 50-2000，特征肽段MRM定量

4. 傅里叶变换红外光谱仪：波数范围4000-400cm-1，分辨率4cm-1，酰胺带与三螺旋结构判别

5. 圆二色谱仪：远紫外区190-260nm扫描，221nm正峰表征胶原三螺旋完整性

6. 垂直电泳系统：SDS-PAGE凝胶电泳，分子量分离范围10-250kDa

7. 凝胶成像分析系统：CCD灰度扫描，面积归一化定量重复性优于2%

8. 紫外-可见分光光度计：波长范围190-900nm，羟脯氨酸显色产物560nm比色

9. 全自动凯氏定氮仪：蒸馏滴定一体化，氮测定范围0.1-200mg

10. 酶标仪：波长405-600nm可选，96孔板酶联免疫法Ⅱ型胶原快速筛查