耶尔森氏菌肠炎检测

检测项目

1.病原菌分离培养：采用CIN琼脂培养基（含头孢磺啶-新生霉素-多粘菌素B），25℃1℃培养48小时
2.毒力基因检测：PCR法测定virF（引物序列F:5'-CGGTAGCGCAAGATGGA-3',R:5'-GCATCTTCCTGTTGTTCTCG-3'）
3.血清分型：采用玻片凝集法测定O:3、O:5,27、O:8等常见血清型
4.生化鉴定：VITEK2Compact系统测试β-半乳糖苷酶、尿素酶等23项生化指标
5.药敏试验：CLSIM45-A3标准测试氨苄西林（10μg）、环丙沙星（5μg）等12种抗生素MIC值

检测范围

1.食品样本：生鲜猪肉（胴体表面拭子）、巴氏杀菌乳（250mL原包装）
2.临床样本：患者粪便（≥2g）、血液培养物（需氧瓶+厌氧瓶）
3.环境样本：食品加工车间台面拭子（1010cm采样面积）、冷却水（500mL无菌瓶）
4.动物样本：猪回盲部淋巴结（冷冻保存）、禽类泄殖腔拭子
5.培养基质控：CIN琼脂平板（每批次抽检3%作阴性对照）

检测方法

1.ISO10273:2017《食品和动物饲料中致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌的检测》
2.GB/T4789.8-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》
3.WS/T489-2016《小肠结肠炎耶尔森氏菌感染的诊断》
4.ASTMF3170-17《食品接触表面耶尔森氏菌快速检测指南》
5.SN/T2524-2010《进出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法》

检测设备

1.ThermoScientificHeratherm微生物培养箱（型号IMH180）：25℃0.5℃精密温控
2.BioMerieuxVITEK2Compact全自动微生物鉴定系统（软件版本8.02）
3.Bio-RadCFX96Touch实时荧光定量PCR仪（支持FRET探针技术）
4.ThermoFisherSorvallST16离心机（最大RCF21,130g）
5.SartoriusMicrosartAM真菌/细菌过滤装置（孔径0.45μm）
6.OlympusCX43生物显微镜（100油镜观察动力试验）
7.BDBACTECFX40全自动血培养系统（配套Lytic/10Anaerobic/F培养瓶）
8.MettlerToledoSevenExcellencepH计（精度0.002pH）
9.EppendorfMastercyclernexus梯度PCR仪（热盖温度105℃）
10.LabconcoPurifierLogic+生物安全柜（ClassIIA2型）