检测项目

1.HCMV-DNA实时荧光定量PCR:灵敏度≤50copies/mL,线性范围10^2-10^7copies/mL

2.HCMVpp65抗原血症检测:阳性阈值≥5个阳性细胞/200,000白细胞

3.血清IgM/IgG抗体ELISA:IgM临界值OD450≥1.2,IgG亲和力指数<40%提示近期感染

4.胰腺组织HCMV免疫组化:采用IE1/pp65单克隆抗体(克隆号:CCH2+DDG9)

5.病毒分离培养:使用MRC-5人胚肺成纤维细胞系,CPE观察周期14-21天

检测范围

1.血清样本:用于抗体检测及病毒载量分析

2.血浆样本:EDTA抗凝处理后的核酸提取基质

3.胰腺组织活检:福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)标本

4.胰液样本:ERCP术中采集的胰管分泌物

5.尿液样本:离心沉淀物用于病毒分离培养

检测方法

1.实时荧光定量PCR:ISO15189:2012医学实验室质量体系

2.ELISA抗体检测:GB/T37868-2019《免疫测定试剂盒通用技术要求》

3.免疫组化染色:WS/T246-2005《免疫组织化学技术指南》

4.病毒分离培养:CLSIM41-A《病毒培养标准指南》

5.抗原血症检测:ASTME2877-12《流式细胞术操作规程》

检测设备

1.RocheCobasz480实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法多重检测

2.ThermoFisherMultiskanFC酶标仪:波长范围340-850nm,96孔板读取

3.LeicaBOND-III全自动免疫组化仪:20分钟抗原修复程序

4.BDFACSCantoII流式细胞仪:配置488nm/640nm双激光系统

5.AbbottArchitecti2000SR化学发光仪:检测速度400测试/小时

6.EppendorfCentrifuge5430R:最大转速30,000g,温控范围-9C至40C

7.NikonEclipseNi-U显微镜:配置DS-Fi3高清摄像系统

8.MemmertCO₂培养箱:温度控制精度0.1C,CO₂浓度5%0.2%

9.QiagenQIAcube全自动核酸提取仪:磁珠法提取效率≥95%

10.Bio-RadCFX96TouchqPCR系统:支持HRM熔解曲线分析