检测项目
1. 样本前处理与富集:样品均质化处理,芽孢激活与复苏培养,干扰物质去除。
2. 传统平板培养计数:活菌总数测定,特征性菌落形态学鉴定,纯培养物分离。
3. 显微镜镜检分析:革兰氏染色镜检,芽孢特殊染色(如孔雀绿染色)观察,荚膜染色检查。
4. 分子生物学检测:特异性基因(如pagA、capA、rpoB)聚合酶链式反应筛查,实时荧光定量PCR定量分析,毒力质粒存在性确认。
5. 免疫学检测:酶联免疫吸附试验检测保护性抗原,胶体金免疫层析试纸条快速筛查,免疫荧光染色。
6. 生化反应鉴定:运动性试验,溶血性检验,关键碳水化合物发酵试验,特定酶活性检测。
7. 噬菌体裂解试验:利用特异性噬菌体进行裂解反应,辅助菌株鉴定。
8. 动物实验(在高级别生物安全实验室进行):致病性验证,半数致死量测定,疫苗效力评价。
9. 芽孢活力与抗性测试:热抗力测定,化学消毒剂耐受性评估,紫外线照射存活率检测。
10. 毒素活性检测:细胞毒性试验检测致死毒素活性,水肿因子活性测定。
11. 环境存活能力评估:模拟土壤、水体等环境中芽孢存活周期监测。
12. 抗生素敏感性试验:针对分离菌株进行最小抑菌浓度与最小杀菌浓度测定。
13. 菌株分型与溯源分析:多位点序列分型,可变数目串联重复序列分析,全基因组测序比对。
检测范围
疑似感染动物组织及血液、皮毛与毛发制品、骨粉与饲料添加剂、土壤与尘埃样本、水体与污水、临床病人标本、空气气溶胶采样滤膜、可疑白色粉末等不明物质、实验室培养物与污染物、食品及农产品、化妆品原料中的动物源性成分、进出口货物包装材料、生物反恐应急采样样本、疫源地环境拭子、医疗废弃物、实验动物尸体及垫料、工业原料皮革与羊毛、历史档案与文物标本
检测设备
1. 二级及以上生物安全柜:提供人员、样品及环境防护,确保所有活菌操作在安全密闭空间内进行。
2. 恒温培养箱与厌氧培养系统:用于炭疽杆菌的增殖培养,提供适宜且稳定的温度与气体环境。
3. 全自动微生物生化鉴定系统:通过微量生化反应快速完成细菌的种属鉴定与确认。
4. 实时荧光定量聚合酶链式反应仪:对炭疽杆菌特异性基因进行高灵敏度、高特异性的定性与定量分析。
5. 酶标仪与洗板机:用于自动化执行酶联免疫吸附试验,读取吸光度值以分析抗原或抗体含量。
6. 高速冷冻离心机:用于样本中细菌、芽孢或核酸的快速浓缩、分离与纯化。
7. 光学显微镜与成像系统:进行细菌形态、染色特性及细胞病变效应的观察与图像记录。
8. 凝胶电泳系统:对常规聚合酶链式反应产物进行分离、确认与初步分析。
9. 菌落计数仪与自动涂布仪:实现平板菌落的快速、准确计数与标准化接种。
10. 高压蒸汽灭菌器:对所有实验废弃物及可能污染的器材进行彻底灭活,确保生物安全。