可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
肿瘤细胞系 肿瘤代谢重编程研究、谷氨酰胺依赖性评估、代谢表型筛选 谷氨酰胺消耗速率、三羧酸循环中间物M加n标记分布、还原性羧化通量、谷胱甘肽与核苷酸从头合成标记 超高效液相色谱串联质谱靶向同位素分析，冷甲醇淬灭提取，天然丰度校正
原代细胞与干细胞 间充质干细胞成骨向分化代谢评估、诱导多能干细胞定向分化代谢状态监测 线粒体三羧酸循环流入通量、天冬氨酸与嘧啶核苷酸合成标记、胞内代谢物库绝对定量 液相色谱串联质谱靶向代谢组分析，蛋白量归一化定量
免疫细胞 淋巴细胞活化代谢研究、巨噬细胞极化模型代谢表型分析 谷氨酰胺酶通路活性评估、三羧酸循环断点分析、分泌型代谢物通量 同位素示踪结合流式分选后质谱分析
工程细胞株 中国仓鼠卵巢细胞、人胚肾细胞培养工艺开发、补料策略优化 谷氨酰胺消耗与氨释放速率、丙氨酸分泌标记、批次培养代谢流比较 培养上清消耗分泌通量测定联用胞内示踪分析
微生物菌株 大肠杆菌、酿酒酵母中心碳代谢研究、基因改造株代谢表型鉴定 谷氨酰胺回补通量、碳流分布比例、胞内氨基酸库标记动力学 稳定同位素示踪耦联气相色谱质谱或液相色谱质谱分析
类器官与三维培养体系 组织来源类器官营养依赖性研究、微环境代谢竞争分析 谷氨酰胺利用份额、葡萄糖与谷氨酰胺碳源贡献比例、乳酸分泌标记 双示踪设计结合高分辨质谱定性定量
细胞提取物与培养上清 胞内代谢物库浓度测定、消耗分泌速率计算、示踪动力学采样 五十至三百种代谢物绝对定量、M加n摩尔分数分布、标记稳态判定 色谱串联质谱多重反应监测，稳定同位素内标法定量

检测项目

1. 谷氨酰胺流向标记率：碳十三五标记谷氨酰胺示踪，下游代谢物M加n摩尔分数0.1%-99.9%

2. 三羧酸循环中间物同位素分布：α-酮戊二酸、柠檬酸、琥珀酸、延胡索酸、苹果酸的M加3至M加6同位素体占比

3. 还原性羧化通量比：柠檬酸M加5与M加6摩尔比0.05-5.0，评估异柠檬酸脱氢酶反向通量

4. 谷氨酰胺消耗与分泌速率：消耗速率0.01-10微摩尔每升每小时，丙氨酸与乳酸分泌标记同步测定

5. 谷胱甘肽与核苷酸从头合成标记：还原型谷胱甘肽、腺苷酸、尿苷酸标记率，胞内浓度0.1-100纳摩尔每毫克蛋白

检测范围

1. 肿瘤细胞系：宫颈癌细胞、肝癌细胞、肺癌细胞、肠癌细胞等贴壁与悬浮培养体系

2. 免疫细胞：原代淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞活化与极化研究模型

3. 工程细胞株：中国仓鼠卵巢细胞、人胚肾细胞、杂交瘤细胞培养工艺代谢研究

4. 干细胞与原代细胞：间充质干细胞、诱导多能干细胞及定向分化体系

5. 微生物体系：大肠杆菌、酿酒酵母中心碳代谢与基因改造株表征

检测方法

1. GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求

2. GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范 理化检测

3. GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法

4. JJG 705-2014 液相色谱仪检定规程

5. JJF 1059.1-2012 测量不确定度评定与表示

6. ISO/IEC 17025:2017 检测和校准实验室能力的通用要求

检测设备

1. 超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用仪：质量范围50-1500道尔顿，多重反应监测模式，驻留时间低至1毫秒

2. 四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪：分辨率100000以上，质量精度小于3ppm

3. 气相色谱-质谱联用仪：质量范围1.6-1050道尔顿，电子轰击电离源70电子伏特

4. 二氧化碳培养箱：温度控制37±0.1℃，二氧化碳浓度5%±0.1%

5. 二级生物安全柜：下降风速0.25-0.35米每秒，高效过滤器效率99.99%

6. 高速冷冻离心机：最高转速15000转每分钟，温控范围-10℃至40℃

7. 超声波细胞破碎仪：输出功率20-500瓦连续可调，配备变幅杆与隔音箱

8. 氮吹浓缩仪：控温范围室温至100℃，气压0-0.6兆帕可调

9. 冷冻干燥机：冷阱温度低至-80℃，极限真空度小于10帕

10. 分析天平：量程0-220克，可读性0.01毫克，四级防震