可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
动物抗凝全血（EDTA抗凝） 犬、牛、马、羊等动物血液原虫感染排查与疫病监测 血涂片镜检、巴贝西虫DNA核酸检测、红细胞感染率统计 吉姆萨染色镜检；套式PCR／实时荧光定量PCR
动物血清／血浆 犬舍、奶牛场、马场群体筛查与免疫状态评估 IgG、IgM抗体筛查，抗体滴度测定 ELISA法、间接荧光抗体法（IFA）
蜱及蜱媒监测样本 牧场、犬只活动区蜱媒携带率调查与媒介生物监测 蜱种形态鉴定、蜱体内巴贝西虫核酸筛查、携带率统计 形态学鉴定结合PCR扩增
组织病理样本（脾、肝、肺等） 动物疫病剖检复核与病理学诊断辅助 组织压片镜检、病理切片染色观察、组织核酸检测 苏木精伊红染色、PCR法
实验动物送检样本 实验犬及实验动物寄生虫学等级监测 血液原虫筛查、寄生虫学等级判定 GB/T 14926.1-2001监测体系
引种与隔离检疫样本 跨区域引种、进出境动物隔离期病原排查 巴贝西虫核酸筛查、虫种分型鉴定 WOAH陆生动物手册推荐方法结合PCR
动物源血液与血清原料 动物源生物材料生产用原料的病原安全评估 巴贝西虫核酸定性筛查、微生物负载评估 实时荧光定量PCR筛查

检测项目

1. 血涂片显微镜检查：吉姆萨染色后油镜1000×观察红细胞内虫体，红细胞感染率报告范围0.01%-10%以上

2. 巴贝西虫DNA核酸检测：套式PCR与实时荧光定量PCR，检测下限可达每反应10 copies数量级

3. 抗体筛查：ELISA与间接荧光抗体法测定IgG、IgM，方法学敏感性与特异性通常可达95%以上

4. 虫种分型鉴定：18S rRNA基因测序，可区分大巴贝西虫、吉布森巴贝西虫、双芽巴贝西虫、牛巴贝西虫、马巴贝西虫、驽巴贝西虫等

5. 蜱媒携带率统计：按批次报告蜱样本阳性率与优势蜱种构成比

检测范围

1. 犬猫等伴侣动物：大巴贝西虫、吉布森巴贝西虫等犬源虫种

2. 牛：双芽巴贝西虫、牛巴贝西虫、大巴贝西虫等牛源虫种

3. 马属动物：马巴贝西虫、驽巴贝西虫（马泰勒虫）

4. 羊、鹿等反刍动物：莫氏巴贝西虫、绵羊巴贝西虫等

5. 蜱媒监测采集的硬蜱样本：携带巴贝西虫的媒介监测

检测方法

1. NY/T 541-2016 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

2. GB/T 14926.1-2001 实验动物 寄生虫学等级及监测

3. GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求

4. WOAH《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（2021版）巴贝西虫病相关章节：血涂片镜检、PCR与血清学方法

5. 套式PCR与实时荧光定量PCR法：针对18S rRNA基因保守区设计引物与探针，定性定量报告核酸结果

检测设备

1. 生物显微镜：目镜10×，物镜4-100×油镜，配数码成像系统

2. 实时荧光定量PCR仪：96孔样品模块，5色荧光检测通道

3. 梯度PCR仪：温度范围4-99℃，控温精度±0.2℃

4. 全自动核酸提取仪：磁珠法提取，32通量，单批次提取约30分钟

5. 酶标仪：波长范围400-750nm，标配450nm检测光路

6. 洗板机：8通道与12通道可切换，残液量不高于2μL

7. 台式高速冷冻离心机：最高转速15000rpm，支持4℃低温分离

8. 恒温孵育箱：温度范围室温加5-70℃，温度波动±0.5℃

9. 超净工作台：垂直层流洁净台面，洁净度达ISO 5级