可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
实验动物骨髓细胞 小鼠、大鼠、地鼠等实验动物遗传质量监测与致突变效应评价 二倍体数目2n、G显带核型、染色体畸变率、有丝分裂指数 秋水仙素阻滞+低渗-空气干燥制片+Giemsa染色;OECD 475
外周血淋巴细胞 实验动物与畜禽物种核型建立、种间比对、性染色体组成确认 二倍体数目、核型公式、相对长度与臂比、G带带型 植物血凝素刺激培养约72小时,低渗-空气干燥法制片,Giemsa染色
水产动物组织细胞 鱼类、虾蟹、贝类种质资源研究与多倍体育种材料评价 二倍体数目2n、染色体分组、核型公式、染色体臂数 头肾或鳃细胞悬液,秋水仙素前处理,空气干燥制片,Giemsa染色
植物根尖分生组织 蚕豆、大蒜、洋葱、小麦等核型建立与有丝分裂观察 有丝分裂指数、中期染色体形态、随体与次缢痕、核型类型 卡诺固定液固定、盐酸解离、改良苯酚品红染色压片法
体外培养细胞系 CHO、V79、CHL等传代细胞遗传稳定性与倍性组成监测 染色体数目分布、众数判定、畸变率、倍性组成 秋水仙素阻滞+低渗+空气干燥制片;GB/T 21794-2008、OECD 473
遗传毒理受试物分析样品 化学品、食品添加剂、农药、消毒产品等致突变性筛查 断裂、断片、易位、双着丝粒等结构畸变与数目畸变率 体外哺乳类细胞染色体畸变试验;GB 15193.23-2015
细胞库种子细胞鉴别材料 细胞库质量控制、细胞来源鉴别与交叉污染排查 与众数参考核型比对、标志染色体、数目变异范围 中期分裂相自动扫描+核型分析系统,按ISCN 2020命名规则描述

检测项目

1. 二倍体数目判定(2n):每份样品计数不少于100个分散良好的中期分裂相,取众数报告,如小鼠2n=40、大鼠2n=42、猪2n=38、牛2n=60、鸡2n=78、斑马鱼2n=50。

2. 核型公式与染色体分组:按相对长度与着丝粒位置编号配对,臂比1.00-1.70为中着丝粒、1.71-3.00为亚中着丝粒、3.01-7.00为亚端着丝粒、7.00以上为端部着丝粒,汇总写出核型公式。

3. G显带带型分析:常规中期标本分辨300-550条带,逐对识别同源染色体,判定缺失、易位、倒位等结构重排。

4. 染色体畸变率统计:计数200个中期分裂相,分类报告断裂、断片、双着丝粒、环状染色体与易位发生率,以百分率出具。

5. 有丝分裂指数:计数1000个细胞中的分裂相比例,常规样品一般在1%-10%区间。

6. 性染色体组成判别:确认哺乳动物XY型、鸟类与鱼类ZW型等性染色体组成,用于种群性别构成与育种材料确认。

检测范围

1. 实验动物:小鼠(2n=40)、大鼠(2n=42)、金黄地鼠(2n=44)、兔(2n=44)等骨髓与外周血样品。

2. 畜禽动物:猪(2n=38)、牛(2n=60)、山羊(2n=60)、绵羊(2n=54)、马(2n=64)、鸡(2n=78,ZW型)等。

3. 水产动物:斑马鱼(2n=50)、草鱼(2n=48)、鲤鱼(2n=100)、尼罗罗非鱼(2n=44)及虾蟹贝类。

4. 植物材料:蚕豆(2n=12)、大蒜(2n=16)、洋葱(2n=16)、玉米(2n=20)、小麦(2n=42)等根尖与幼芽分生组织。

5. 培养细胞:CHO、V79、CHL、L5178Y等传代细胞系与原代培养细胞。

6. 受试物类别:化学品、食品添加剂、农药、消毒产品、新材料浸泡液等遗传毒理评价样品。

检测方法

1. GB/T 21794-2008 化学品 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验方法。

2. GB 15193.23-2015 食品安全国家标准 体外哺乳类细胞染色体畸变试验。

3. OECD化学品测试导则No.473 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验。

4. OECD化学品测试导则No.475 哺乳动物骨髓染色体畸变试验。

5. ISCN 2020 国际细胞遗传学命名体制,统一核型描述与异常表述规则。

6. 植物根尖采用卡诺固定液固定、1mol/L盐酸解离、改良苯酚品红染色的常规压片法,孚尔根染色法作补充。

检测设备

1. 二氧化碳培养箱(水套式):温度37±0.5℃,二氧化碳体积分数5%±0.2%。

2. 倒置生物显微镜:配置10×、20×、40×物镜,相差装置观察细胞生长状态。

3. 正置研究级显微镜:配置100×油镜,观察Giemsa染色与G显带标本。

4. 全自动玻片扫描平台:中期分裂相自动识别与捕获,单片扫描不超过10min。

5. 核型分析系统:染色体自动分割、配对与核型图排版,支持带型识别与测量。

6. 恒温水浴槽:室温至100℃,控温精度±0.5℃,用于低渗与恒温处理。

7. 低速台式离心机:转速100-4000r/min,用于细胞收集与固定液更换。

8. 垂直层流超净工作台:洁净度达到百级,用于接种与换液无菌操作。

9. 压力蒸汽灭菌器:工作压力0.22MPa,温度121℃,用于器具与培养基灭菌。

10. 电热恒温鼓风干燥箱:室温至300℃,用于玻片老化与器皿干热处理。