可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
细胞培养上清来源外泌体 间充质干细胞、HEK293、肿瘤细胞等规模化培养收获外泌体制剂 粒径分布、颗粒浓度、CD9/CD63/CD81、ALIX、TSG101、总蛋白、Zeta电位 差速超速离心结合尺寸排阻色谱（SEC）纯化，NTA定量，免疫印迹验证标志物
血清/血浆外泌体 液体活检标志物筛选与疾病早筛研究 循环外泌体浓度、表面标志物表型、miRNA与蛋白内容物 免疫磁珠捕获（EpCAM/CD63）富集，NTA与RT-qPCR联用；EDTA或枸橼酸钠抗凝采血
尿液外泌体 肾脏与泌尿系统疾病无创标志物研究 尿外泌体颗粒浓度、AQP1/AQP2等蛋白标志物、miRNA、纯度 超速离心或聚合物共沉淀富集，透射电镜形态确认
脑脊液、房水、关节液等微量体液外泌体 神经退行性疾病、眼科疾病与骨关节炎研究 微量样品颗粒计数、标志物蛋白、囊泡核酸 免疫亲和捕获富集，高灵敏度流式细胞术分析
乳汁及唾液外泌体 营养传递途径与口腔、消化道标志物研究 乳源外泌体粒径与电位、免疫活性蛋白、miRNA 脱脂差速离心结合SEC，NTA表征，BCA总蛋白定量
植物外泌体样纳米囊泡 生姜、葡萄柚、人参等植物来源纳米囊泡递送研究 粒径分布、Zeta电位、包封率、植物活性成分负载量 榨汁差速离心结合蔗糖密度梯度，DLS与TEM表征
工程化与载药外泌体 外泌体载药、表面修饰与靶向递送开发 载药量、包封率、靶向配体密度、细胞摄取效率 荧光标记定量、超滤去除游离药物、流式细胞术评估摄取

检测项目

1. 粒径分布：主流外泌体粒径30-150nm，NTA测量范围10-1000nm，分辨率1nm

2. 颗粒浓度：10⁶-10¹⁰个/mL，NTA检出下限约10⁶个/mL

3. 标志物蛋白：CD9、CD63、CD81、ALIX、TSG101阳性检出，Calnexin、GM130阴性对照

4. Zeta电位：生理pH条件下典型值-40~-10mV，表征囊泡表面电荷与胶体稳定性

5. 纯度颗粒蛋白比：高纯度外泌体制剂一般不低于1×10¹⁰个/μg蛋白

6. 总蛋白定量：BCA法562nm比色，线性范围25-2000μg/mL

检测范围

1. 细胞上清外泌体：间充质干细胞、免疫细胞、肿瘤细胞培养来源

2. 体液外泌体：血清、血浆、尿液、脑脊液、乳汁、唾液

3. 植物外泌体样囊泡：生姜、葡萄柚、人参、西兰花来源

4. 工程化外泌体：载药囊泡、抗体或多肽表面修饰囊泡

5. 外泌体制剂：浓缩悬液、海藻糖保护冻干粉、分装冻存样品

6. 其他细胞外囊泡亚群：微囊泡（100-1000nm）、凋亡小体（1-4μm）

检测方法

1. MISEV2018 国际细胞外囊泡学会《细胞外囊泡研究最小信息要求》，外泌体分离与表征的行业通行指南

2. ISO 20387:2018 生物技术 生物样本库质量和能力通用要求

3. GB/T 37864-2019 生物样本库质量和能力通用要求

4. GB/T 19627-2005 粒度分析 光子相关光谱法（动态光散射DLS粒径测定）

5. ISO 22412:2017 粒度分析 动态光散射法（DLS）

检测设备

1. 纳米颗粒跟踪分析仪（NTA）：粒径测量范围10-1000nm，颗粒浓度10⁶-10¹⁰个/mL

2. 透射电子显微镜（TEM）：点分辨率0.2nm级，加速电压80-120kV

3. 动态光散射与Zeta电位仪：粒径0.3nm-10μm，电位测量范围±500mV

4. 超速离心机：最高转速100000rpm，最大相对离心力约800000×g，温控4℃

5. 蛋白免疫印迹系统：化学发光成像，检测限皮克级，用于CD9/CD63/CD81/ALIX/TSG101验证

6. 高灵敏度流式细胞仪：激光波长488/640nm，检测膜标志物荧光阳性囊泡

7. 全波长酶标仪：波长范围200-1000nm，波长精度±1nm，BCA法562nm总蛋白定量

8. 尺寸排阻色谱分离系统：填料分离范围10⁴-4×10⁶Da，匹配10-200nm囊泡组分收集

9. 免疫磁珠捕获系统：链霉亲和素磁珠偶联CD63抗体，捕获容量10-100μg/柱

10. 超低温保存箱：温度范围-86~-50℃，温度均匀性±3℃，样品转运与暂存